Question

如圖18所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb)，(1)那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切開        B．能被E但不能被F切開

C．既不能被E也不能被F切開    D．能被F但不能被E切開

(2)已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)0．8kb，限制酶H切割位點(diǎn)距限制酶F切割位點(diǎn)O．5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣 品，據(jù)表4所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為___________kb（2分）；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中。（2分）

(3)若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導(dǎo)入至山羊的______細(xì)胞中。若pZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是__________。（2分）

(4)上述目的基因模板鏈中的。TGA序列對應(yīng)一個(gè)密碼子，翻譯時(shí)識別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是________。（2分）

 

Answer 1

【答案】

(1).A

(2).1.2    見右圖

(3).受精卵  轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配

(4).UGA 

【解析】.用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb)，用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點(diǎn)，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故本題選A。根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb切去EF之間的還有3.5kb，插入目的基因后構(gòu)成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，可推導(dǎo)出目的基因長度為1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點(diǎn)距E的切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶識別位點(diǎn)外，還有一個(gè)G酶識別位點(diǎn)；H的酶切位點(diǎn)距F0.5kb，用H單獨(dú)酶切產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中含有另外一個(gè)H的酶切位點(diǎn)，根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H的識別位點(diǎn)標(biāo)注在圖19中”，可確定在EF之間分別含有G和H的一個(gè)識別位點(diǎn)�？蓴喽℅的識別位點(diǎn)，在舉例E點(diǎn)右側(cè)0.8kb處，H的識別位點(diǎn)在距F左側(cè)0.7kb處。將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。目的基因的模板連中堿基為TGA，則mRNA中對應(yīng)的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA，在翻譯的過程中，一個(gè)核糖體一般可以容納兩個(gè)tRNA攜帶氨基酸進(jìn)入核糖體與mRNA進(jìn)行互補(bǔ)配對，使得兩個(gè)氨基酸之間脫水縮合形成肽鍵，最多不會(huì)超過3個(gè)�；�因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為mRNA，作為基因開始轉(zhuǎn)錄形成的在mRNA上的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn)應(yīng)在mRNA兩端；作為起始密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)之后，終止密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)之前，這樣才能保證翻譯的正常開始和終止。