Question

（7分）如圖18所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb)，

(1)那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切開           B．能被E但不能被F切開

C．既不能被E也不能被F切開       D．能被F但不能被E切開

(2)已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點距限制酶E切割位點0.8kb，限制酶H切割位點距限制酶F切割位點O.5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，據(jù)表4所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為___________kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點標(biāo)注在圖19中。（2分）

(3)若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則應(yīng)該選擇的受體細(xì)胞是______。若pZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是__________。

(4)上述目的基因模板鏈中的TGA序列對應(yīng)一個密碼子，翻譯時識別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是________。

 

Answer 1

【答案】

（7分）

（1）A    （2）1.2

（2分）

（3）受精卵   轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配     （4）UGA

【解析】

試題分析：⑴限制酶具有專一性，只能識別特定的DNA序列，并在特定的位點切割磷酸二酯鍵形成DNA片段。由題意可知，重組質(zhì)粒上含有限制酶E和F的切割位點，所以既能被E也能被F切開。A項正確。

⑵根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb，切去EF（0.2kb）之后還有3.5kb，插入目的基因后形成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒的長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，進(jìn)而可推導(dǎo)出目的基因長度為4.7－3.5＝1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點距E的切割位點0.8kb，單獨用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶切位點外，還有一個G酶切位點；H的酶切位點距F0.5kb，用H單獨酶切后產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的H酶切位點外，還有一個H酶切位點；根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點標(biāo)注在圖中”，可確定在EF之間分別含有一個G和H的酶切位點，進(jìn)而可斷定G的識別位點，在距E點右側(cè)0.8kb處，H的識別位點在距F左側(cè)0.7kb處。

⑶將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞中，通常以受精卵為受體細(xì)胞；重組質(zhì)粒若插入一條染色體DNA上后，可通過雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。

⑷根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，目的基因的模板鏈中堿基為TGA，則mRNA中對應(yīng)的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA。

考點：本題考查基因工程的相關(guān)知識，涉及基因工程限制酶酶切位點的確定，常用受體細(xì)胞，密碼子和反密碼子的推導(dǎo)等相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學(xué)知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷的能力。