Question

【題目】分離篩選降解纖維素能力強的微生物對于解決秸稈等廢棄物資源的再利用和環(huán)境污染問題具有理論和實際意義。研究人員從土壤和腐爛的秸稈中分離篩選出能高效降解纖維素的菌株，并對篩選出的菌株進行了初步研究。

（1）對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是 。為在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，若以接種環(huán)為工具，則用 法進行接種。

（2） 先將樣品懸液稀釋后涂在放有濾紙條的固體培養(yǎng)基上進行篩選得到初篩菌株。再將初篩菌株接種到以 為唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)2～5天，加入 溶液后，依據(jù)出現(xiàn)的顏色反應(yīng)進行篩選，觀察菌落特征并測量 。同時將初篩菌株制備成的菌液放入加有濾紙條的液體培養(yǎng)基中，恒溫振蕩培養(yǎng)8天，觀察濾紙條的破損情況。結(jié)果見表。由表可知，8種菌株中1、3、7號菌株產(chǎn)酶能力較強,原因是 。

注: ① DP = （D / d） 2，其中d表示菌落直徑（cm） ，D表示水解圈直徑（cm）

②“+”為濾紙邊緣膨脹， “+ + ”為濾紙整齊膨脹并彎曲，“+ + + ”為濾紙不定形“+ + + +”為成團糊狀“+ + + + +” 為半清狀

（3） 為進一步研究1、3、7號菌株對秸稈降解的效果。分別用這三種菌株對秸稈進行處理，并在第5天和第10天對秸稈和秸稈中含有的纖維素、半纖維素以及木質(zhì)素等組分的降解情況進行了測定。結(jié)果見下圖。

由圖分析可知，三種菌株對 的降解最強，與第5天結(jié)果相比，第10天秸稈各組分中 的降解率變化最大。整體分析 號菌株的降解效果最好。

Answer 1

【答案】

（1）高壓蒸汽滅菌 平板劃線

（2）纖維素 剛果紅 透明圈直徑與菌落直徑 此三種菌株透明圈直徑與菌落直徑的比都較高,且濾紙片破損程度高

（3）半纖維素 纖維素 7

【解析】

（1）對培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。形成單個菌落可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線法應(yīng)用的是接種環(huán)，稀釋涂布平板法用的是涂布器，故是平板劃線法。

（2）要篩選降解纖維素的細菌，所以應(yīng)以纖維素為唯一碳源，同時用剛果紅染色法。因為剛果紅可以和纖維素這樣的多糖形成紅色絡(luò)合物，而和纖維二糖和單糖不會，所以出現(xiàn)透明圈后可以確定有纖維素分解菌。透明圈和菌落直徑直徑越大，說明降解效果越好。因為1,3,7號菌株透明圈直徑與菌落直徑的比都較高,且濾紙片破損程度高，所以它們的降解效果好。

（4）由圖可知三種菌株對半纖維素的降解能力最強，與第5天結(jié)果相比，第10天秸稈各組分中纖維素的降解率變化最大，由原來的較低到50%左右。整體分析，數(shù)7號菌株的降解率最高，所以效果最好。

土壤中分解尿素的細菌	分解纖維素的微生物
①選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源 ②鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細菌能分解尿素	①選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源 ②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈