Question

11．自然界中的微生物往往是混雜生長的．人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進行數(shù)量的測定．下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗，請回答有關(guān)問題．
【步驟】：①制備稀釋倍數(shù)為10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶的系列稀釋液．
         ②用稀釋涂抹平板法接種樣品．
         ③適宜溫度下培養(yǎng)．
【結(jié)果分析】：
（1）大多數(shù)的細(xì)菌、真菌和單細(xì)胞藻類能在固體培養(yǎng)基上形成孤立的菌落，最常用的分離、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基．
（2）測定的大腸桿菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，其中可信度最高的是D．
A．一個平板，統(tǒng)計的菌落是23
B．兩個平板，統(tǒng)計的菌落是22和26，取平均值26
C．三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26
D．四個平板，統(tǒng)計的菌落分別是21、30、24和25，取平均值25
（3）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中測得平板上菌落的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是（涂布平板時所用稀釋的體積為0.2mL）1.17×10⁸個．
（4）用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多，因為一個菌落可能由兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成．
（5）某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，不能（能或不能）肯定該大腸桿菌的品系被污染了，因為因為該雜菌可能來自培養(yǎng)過程．

Answer 1

分析 本題考查微生物的計數(shù)方法，可從兩種接種方法的優(yōu)缺點和統(tǒng)計菌落數(shù)目時應(yīng)注意的問題入手解答該題．稀釋混合平板法是將土壤懸液對號放入平皿，然后再倒入溶化后冷卻45℃左右的培養(yǎng)基，邊倒入邊搖勻，使樣品基中的微生物與培養(yǎng)基混合均勻，待冷凝成平板后，分別培養(yǎng)后，再挑取單個菌落，直接獲得純培養(yǎng)的方法．

解答 解：（1）大多數(shù)的細(xì)菌、真菌和單細(xì)胞藻類能在固體培養(yǎng)基上形成孤立的菌落，最常用的分離、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基．
（2）D中設(shè)有多個重復(fù)組，且實驗結(jié)果相差不大，故D結(jié)果最可信．
（3）由于菌落數(shù)的平均值為23.4，稀釋倍數(shù)是10⁶，所取稀釋液的體積為0.2mL，故每毫升樣品中的菌落數(shù)是23.4÷0.2×10⁶=1.17×10⁸．
（4）因為菌落可能由兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成，所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多．
（5）因未設(shè)置空白對照，不能確定培養(yǎng)基是否被污染，故不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程．
故答案為：
（1）固體培養(yǎng)基     瓊脂固體培養(yǎng)基   
（2）D     
（3）1.17×10⁸個     
（4）多　一個菌落可能由兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成 
（5）不能    因為該雜菌可能來自培養(yǎng)過程

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程，分離微生物和統(tǒng)計活菌數(shù)常用的常用方法，主要考查學(xué)生設(shè)計和完善實驗步驟，分析實驗結(jié)果獲取結(jié)論的能力和提出問題進行進一步探究的能力，利用所學(xué)的微生物知識解決生活問題的能力．