Question

內(nèi)皮素（ET）是一種多肽,主要通過與靶細(xì)胞膜上的ET受體（ETA）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實(shí)現(xiàn)ETA基因在大腸桿菌細(xì)胞中的高效表達(dá)，其過程如下圖所示，

圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識(shí)別序列為，限制酶XhoⅠ的識(shí)別序列為。請據(jù)圖分析回答：

（1）進(jìn)行過程①時(shí)，需要加入緩沖液、引物、dNTP和___________酶等。完成過程①②③的目的是

___________。

（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使___________鍵斷開，形成的黏性末端是___________。

（3）構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因上游的啟動(dòng)子是___________的部位，進(jìn)而可驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達(dá)載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是___________。

（4）過程⑥要用CaCl2預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的___________細(xì)胞。

（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測___________。

Answer 1