Question

10．人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答問(wèn)題．
（1）制備單克隆抗體過(guò)程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）制備單克隆抗體過(guò)程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于抗原，使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)抗體的淋巴細(xì)胞，此過(guò)程屬于特異性免疫中的體液免疫．
（3）細(xì)胞內(nèi)DNA的合成一般有兩條途徑，主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑．輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒(méi)有此輔助途徑．
①利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的氨基嘌呤成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是能無(wú)限增殖并分泌特異性抗體．
（4）此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與人絨毛膜促性腺激素（或HCG）特異性結(jié)合，從而診斷早孕．

Answer 1

分析 1．制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過(guò)程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合（物、化、生法）、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．
2．單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
3．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

解答 解：（1）制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過(guò)程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于注射抗原，使小鼠產(chǎn)生分泌抗HCG抗體相應(yīng)的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞．抗體是參與體液免疫的免疫活性物質(zhì)．
（3）①氨基嘌呤可以阻斷在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA．因此配制的HAT培養(yǎng)基中添加氨基嘌呤的成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（4）抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合．人絨毛膜促性腺激素（或HCG）是抗原，可以與抗HCG單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　動(dòng)物細(xì)胞融合　
（2）抗原　抗體　體液
（3）①氨基嘌呤　②能無(wú)限增殖并分泌特異性抗體
（4）人絨毛膜促性腺激素（或HCG）

點(diǎn)評(píng) 本題考查了制備單克隆抗體的相關(guān)內(nèi)容，要求學(xué)生熟記具體流程、原理、篩選目的、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用．