Question

18．科研人員利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因奶牛，并利用乳腺生物反應(yīng)器獲得血清白蛋白．
（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．血清白蛋白基因結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，獲取的方法包括從基因文庫(kù)中獲取和PCR技術(shù)擴(kuò)增，若目的基因想在受體細(xì)胞中順利表達(dá)，需要在基因上游加入特定的乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，同時(shí)在基因下游加入終止子．
（2）目的基因?qū)�入奶牛受精卵中使用的方法是顯微注射技術(shù)，然后利用受精卵進(jìn)行胚胎的早期培養(yǎng)，形成囊胚或桑葚胚，然后進(jìn)行胚胎移植．
（3）為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，可對(duì)供體母牛注射促性腺激素使其超數(shù)排卵，隨后利用獲能處理的精子進(jìn)行體外受精，精子的獲能方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法（化學(xué)法）．
（4）若檢測(cè)轉(zhuǎn)基因胚胎是否成功，需要對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割，然后用DNA分子雜交技術(shù)技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．血清白蛋白基因結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，獲取的方法包括從基因文庫(kù)中獲取和PCR技術(shù)擴(kuò)增．根據(jù)題干信息，“利用乳腺生物反應(yīng)器獲得血清白蛋白”，因此若目的基因在乳腺細(xì)胞中順利表達(dá)，需要在基因上游加入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，同時(shí)在基因下游加入終止子．
（2）目的基因?qū)�入奶牛受精卵中一般采用顯微注射技術(shù)，然后利用受精卵進(jìn)行胚胎的早期培養(yǎng)，形成囊胚或桑葚胚，然后進(jìn)行胚胎移植．
（3）為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，可對(duì)供體母牛注射促性腺激素使其超數(shù)排卵，隨后利用獲能處理的精子進(jìn)行體外受精，精子的獲能方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法（化學(xué)法）．
（4）若檢測(cè)轉(zhuǎn)基因胚胎是否成功，需要對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割，然后用DNA分子雜交技術(shù)技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    PCR技術(shù)擴(kuò)增    乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子
（2）顯微注射技術(shù)    囊胚或桑葚胚
（3）促性腺激素   化學(xué)誘導(dǎo)法（化學(xué)法）
（4）胚胎分割   DNA分子雜交技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，識(shí)記胚胎移植技術(shù)的操作過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．