Question

16．為驗證某種中藥牙膏是否像其廣告宣傳的一樣具有較強的抑菌功效，老師帶領生物興趣小組的同學設計了如下實驗（符合無菌操作要求）．請分析上述實驗過程并回答下列問題：
①用無菌水漱口，向漱口液中加入適量的該中藥牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基；
③將上述樣品接種到培養(yǎng)基上，在適宜條件下進行培養(yǎng)；
④一段時間后，對培養(yǎng)結果進行觀察并進行菌落計數(shù)．
（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板；培養(yǎng)基中牛肉膏的作用主要是為微生物生長提供碳源、磷酸鹽、維生素、氮源等營養(yǎng)物質；培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）微生物并非都是對人體有害的，例如：醋酸菌可用于果醋生產；乳酸桿菌常用于生產酸奶．
（3）食品安全檢測時通常采用大腸桿菌作為致病微生物的指示菌，為測定哪些菌落屬于大腸桿菌，可選用含伊紅美藍指示劑培養(yǎng)基對菌落進行鑒定，大腸桿菌的菌落在該培養(yǎng)基上呈現(xiàn)黑色．
（4）請指出本實驗設計中的一個明顯的錯誤：沒有設置對照實驗，，請加以改正：應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)．
（5）如何證明所用培養(yǎng)基已經徹底滅菌？對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底．．

Answer 1

分析 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌，接種的方法一般有平板劃線法和稀釋涂布平板法．本實驗還應該設置對照實驗，應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)，還要對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底．

解答 解：（1）制備牛肉青蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．牛肉膏可以提供碳源、磷酸鹽、維生素、氮源等．培養(yǎng)基在分裝前往往要進行高壓蒸汽滅菌．
（2）參與果醋制作的是醋酸菌；參與酸奶生產的是乳酸桿菌．
（3）實驗室常用伊紅美藍指示劑鑒定大腸桿菌．
（4）本實驗設計中的一個明顯錯誤是沒有設置對照實驗，應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)．
（5）證明所用培養(yǎng)基是否徹底滅菌，應該對未接種的培養(yǎng)基進行空白培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底．
故答案為：
（1）倒平板   碳源、磷酸鹽、維生素、氮源    高壓蒸氣滅菌
（2）果醋     乳酸桿菌  
（3）伊紅美藍指示劑
（4）沒有設置對照實驗    應將漱口液分為兩份，一份加牙膏，一份不加牙膏分別接種培養(yǎng)
（5）對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底

點評 本題以中藥牙膏為素材，考查微生物培養(yǎng)及實驗設計的相關知識，要求考生識記培養(yǎng)基的制備步驟、培養(yǎng)基的成分及滅菌方法和接種方法；要求考生掌握實驗設計的原則，特別是對照原則和單一變量原則，能對實驗進行完善．