Question

9．利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌（單細(xì)胞真菌），未突變菌不能在含有濃度為10^-5M的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)．菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色．圖甲為選育及提取獲得β-胡蘿卜素流程．

（1）三孢布拉霉負(fù)菌與細(xì)菌共同具有的細(xì)胞器是核糖體．從真菌細(xì)胞中提取酶時(shí)，常常采用凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量不同的酶進(jìn)行分離．
（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖為菌體生長(zhǎng)提供碳源；為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加10^-5M的β━紫羅酮．
（3）進(jìn)行③過(guò)程時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基．為篩選純化β-胡蘿卜素產(chǎn)量高的菌種，采取重復(fù)③④（填圖甲中數(shù)字）過(guò)程．
（4）固體平板培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)程②接種培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；只有少數(shù)菌能生長(zhǎng)形成菌落的根本原因是基因突變頻率低和不定向性．
（5）過(guò)程⑥是濃縮，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品，結(jié)果發(fā)現(xiàn)顏色較淺，導(dǎo)致該現(xiàn)象的原因可能是萃取時(shí)，萃取劑使用量過(guò)少，提取的色素少．
（6）選取胡蘿卜韌皮部細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，其操作步驟是①制備MS培養(yǎng)基；②外植體消毒；③接種；④培養(yǎng)；⑤移栽；⑥栽培．

Answer 1

分析 閱讀題干和題圖可知，本題是利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β━胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌菌種的分離和培養(yǎng)過(guò)程，明確知識(shí)點(diǎn)，梳理相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)，分析題圖，結(jié)合問題的具體提示綜合作答．

解答 解：（1）三孢布拉霉負(fù)菌為真核細(xì)胞，細(xì)菌為原核細(xì)胞，它們共同具有的細(xì)胞器是核糖體．從真菌細(xì)胞中提取酶時(shí)，常常采用凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量不同的酶進(jìn)行分離．
（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖為菌體生長(zhǎng)提供碳源（碳源和能源）；由于未突變菌不能在含有濃度為10^-5M的β━紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，所以為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加10^-5M的β━紫羅酮．該培養(yǎng)基按用途分屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）菌體隨β━胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色，所以進(jìn)行③過(guò)程時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基．為篩選純化β━胡蘿卜素產(chǎn)量高的菌種，采取重復(fù)③④過(guò)程．
（4）固體平板培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)程②接種培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示，所以該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；只有少數(shù)菌能生長(zhǎng)形成菌落的根本原因是基因突變頻率低和不定向性，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長(zhǎng)、繁殖．
（5）過(guò)程⑥是濃縮，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品，結(jié)果發(fā)現(xiàn)顏色較淺，導(dǎo)致該現(xiàn)象的原因可能是萃取時(shí)，萃取劑使用量過(guò)少，提取的色素少．
（6）選取胡蘿卜韌皮部細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，其操作步驟是：①制備MS培養(yǎng)基；②外植體消毒；③接種；④培養(yǎng)；⑤移栽；⑥栽培．
故答案為：
（1）核糖體   凝膠色譜
（2）碳源     10^-5M的β━紫羅酮
（3）橙紅        ③④
（4）稀釋涂布平板法  基因突變頻率低和不定向性
（5）濃縮   過(guò)少
（6）外植體消毒

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是選擇培養(yǎng)基的選擇作用，分離、純化菌種的方法和擴(kuò)大培養(yǎng)的方法；主要考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的分析和判斷能力．