Question

15．科學(xué)家為了提高光合作用過(guò)程中Rubiaco酶對(duì)CO₂的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）．可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物．
（2）PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要加入兩種引物．一個(gè)DNA分子三輪復(fù)制以后，含有兩種引物的DNA分子有6個(gè)．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化．科研人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入或?qū)�入的基因未能�?zhǔn)確表達(dá)．
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入小鼠受精卵的�?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中．有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是B．
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克�。�，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（2）PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要加入兩種引物．一個(gè)DNA分子三輪復(fù)制以后，形成8個(gè)DNA分子，其中有兩個(gè)DNA分子只含有一種引物，另外6個(gè)DNA分子含有兩種引物．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化．培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入或?qū)�入的基因未能�?zhǔn)確表達(dá)．
（4）A、選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)，A正確；
B、采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，檢測(cè)目的基因是否表達(dá)應(yīng)該采用抗原-抗體雜交技術(shù)，B錯(cuò)誤；
C、人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用，C正確；
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克�。�，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代，D正確．
故選：B．
故答案為：
（1）蛋白質(zhì)工程       農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法       植物組織培養(yǎng)
（2）DNA雙鏈復(fù)制      6
（3）轉(zhuǎn)化      所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入或?qū)�入的基因未能�?zhǔn)確表達(dá)
（4）B

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．