Question

【題目】山楂果漿黏度大，含有豐富的果膠。為提高山楂果汁的產(chǎn)量，某興趣小組從土壤中分離產(chǎn)果膠酶的微生物，并探究溫度對果膠酶活性的影響，進行了下列實驗。回答下列問題：

（1）若要分離產(chǎn)果膠酶菌株，需配制以_______________為唯一碳源的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能分離目的菌株的原因是____________________________________________。

（2）將從果園采集的土壤放入適量的無菌水中，振蕩混勻制成土壤懸液，備用。

①為獲得均勻分布的單菌落，先將土壤懸液進行____________處理，然后將處理后的土壤懸液接種于______________（物理狀態(tài)）培養(yǎng)基上。該方法也可用于測定產(chǎn)果膠酶菌的數(shù)量，但測定的菌體數(shù)量通常比實際值______________________。

②若增加對照組可提高實驗結(jié)果的可靠性，對照組的設(shè)置為__________________________。

（3）為探究不同溫度對果膠酶活性的影響，某興趣小組進行了如下實驗：

實驗步驟

①在甲、乙兩支試管中分別加入5mL山楂泥2mL果膠酶，并置于10℃恒溫水浴鍋中保溫5分鐘；

②將步驟①處理后的果膠酶倒入山楂泥中，混勻后10℃保溫20分鐘；

③過濾混合物，收集濾液，測定果汁量；

④將實驗溫度分別設(shè)置為20℃30℃40℃50℃60℃70℃80℃的條件下，重復(fù)實驗步驟①②③，并測定、記錄果汁量。

實驗結(jié)果：（略）

上述實驗步驟①②中先分別保溫、再混合的目的是____________________，該實驗通過______________來判斷果膠酶活性的大小。

Answer 1

【答案】果膠 只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能利用果膠生長繁殖 梯度稀釋 固體 小 在無菌的條件下，將未接種的培養(yǎng)基置于適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 使果膠酶和山楂泥處于實驗設(shè)置的同一溫度條件下，進行酶促反應(yīng) 單位時間、單位體積產(chǎn)生的果汁量

【解析】

選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長，欲分離產(chǎn)果膠酶菌株時，應(yīng)以果膠作為唯一的碳源，只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長繁殖。

（1）要分離出產(chǎn)果膠酶的菌株，需配制以果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基之所以能分離目的菌株是因為除該菌株外其他菌株不含有果膠酶，無法利用果膠，故無法在該培養(yǎng)基上生長。

（2）①為獲得較均勻分布的單菌落，還需要將土壤懸液進行梯度稀釋，使土壤懸液的細菌密度降低，并用稀釋涂布法接種于固體培養(yǎng)基上。由于當(dāng)兩個或多個細胞連在一起生長時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以用上述方法測定的菌體數(shù)量通常比實際值少。

②若要提高實驗結(jié)果的可靠性，需排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，故應(yīng)該設(shè)置培養(yǎng)基中未接種（或接種等量無菌水）的培養(yǎng)皿作為空白對照。

（3）將果膠酶作用的底物與果膠酶先分別保溫，再混合的目的是確保在反應(yīng)時山楂泥和果膠酶是處于同一溫度的，避免為實驗增加其他影響因素。酶的活性大小可用一定時間內(nèi)生成物的量來表示，該實驗是通過單位時間、單位體積產(chǎn)生的果汁量的多少來判斷果膠酶活性的大小。