Question

【題目】菊天牛是菊花的最主要的害蟲，科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花培育出抗蟲菊花，下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程。請(qǐng)回答下列問題：

注:卡那酶素抗性基因（kanR)為標(biāo)記基因，菊花葉片對(duì)卡那霉素高度敏感

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增抗蟲基因時(shí)，需用耐高溫的___________催化，PCR—般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括_____________三步。

(2)常用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，其目的是______________。重組Ti質(zhì)粒整合到菊花葉肉細(xì)胞的________上。

(3)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營養(yǎng)物質(zhì)以及_________的固體培養(yǎng)基中，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因菊花的抗蟲性狀，常用的方法是______________。

(4)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實(shí)驗(yàn)組飼喂轉(zhuǎn)基因植株，對(duì)照組應(yīng)飼喂等量的正常植株。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組的害蟲死亡率明顯高于對(duì)照組，說明__________。

Answer 1

【答案】 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶） 變性、復(fù)性和延伸 提高受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率（或使之成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞） 染色體 卡那霉素 在轉(zhuǎn)基因菊花上投放菊天牛 轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用

【解析】試題分析：分析題圖：圖示為獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程圖，目的基因（抗蟲基因）和質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)，采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株。

（1）PCR技術(shù)中，因需要高溫解旋，故需用耐高溫的DNA聚合酶催化，每次循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)步驟。

（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞時(shí)，常采用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2+（或CaCl2）處理農(nóng)桿菌細(xì)胞，使其處于易于吸收周圍環(huán)境中的感受態(tài)。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。

（3）由圖可知，標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選轉(zhuǎn)基因菊花。檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因菊花的抗蟲性狀，常用方法是投放菊天牛，若菊天牛大量死亡，說明轉(zhuǎn)基因成功。

（4）實(shí)驗(yàn)組的害蟲死亡率明顯高于對(duì)照組，說明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。