Question

8．一種廣泛使用的除草劑（含氮 有機物）在土壤中不易被降解，長期使用可污 染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按圖1程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理．現(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL樣液至盛有9mL無菌水的試管中，照此依次稀釋103稀釋度．各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為 55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為5.6×10⁸． 
（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是
在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑．
（3）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵．在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是 將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落．
（4）在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明圈菌落利用的氮源主要是氮氣．實驗結(jié)果如圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，本題這種根據(jù)流程圖看，“無氮培養(yǎng)基+高濃度的除草劑”，說明A、B、C培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源．
2、每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數(shù)．

解答 解：（1）圖中稀釋的倍數(shù)是10⁸，三個菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷0.1×10³=5.6×10⁵個，所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸個．
（2）該除草劑為含氮有機物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑．
（3）接種技術(shù)的核心是無菌操作，防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度．在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落．
（4）由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮氣了；E透明圈最大，故是最理想菌株．
故答案為：
（1）5.6×10⁸
（2）在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑 
（3）防止外來雜菌的入侵稀釋獲得單個菌落 
（4）氮氣E

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)，篩選微生物的方法、微生物的數(shù)目的測定等方法，主要考查學(xué)生運用微生物的培養(yǎng)技術(shù)解決生活中問題的能力和對微生物，是實驗室培養(yǎng)技術(shù)的綜合應(yīng)用能力．