Question

【題目】下圖是培育抗除草劑玉米的技術(shù)路線圖，含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列相關(guān)敘述不正確的是（ ）

A. 過程①用兩種限制酶就可防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化

B. 過程②用Na+處理可提高轉(zhuǎn)化成功率

C. 過程③應(yīng)在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì)K

D. 篩選得到的A是無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織

Answer 1

【答案】B

【解析】過程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，為了防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，可用兩種限制酶切割目的基因的兩端和質(zhì)粒，A正確；過程②是將構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌體內(nèi)，用Ca2+處理可提高轉(zhuǎn)化成功率，B錯誤；農(nóng)桿菌屬于原核生物，含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，過程③的目的是篩選出成功導(dǎo)入除草劑抗性基因G的愈傷組織（即篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織），表面殘留有農(nóng)桿菌的未轉(zhuǎn)化愈傷組織和成功轉(zhuǎn)化的愈傷組織都含有除草劑抗性基因G，都能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長，但表面殘留的農(nóng)桿菌體內(nèi)的報告基因不能表達(dá)，不會出現(xiàn)藍(lán)色，而成功轉(zhuǎn)化的愈傷組織細(xì)胞內(nèi)含有的報告基因則能正確表達(dá)，進(jìn)而出現(xiàn)藍(lán)色，所以篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織，其培養(yǎng)基中應(yīng)加入除草劑和物質(zhì)K，最終篩選得到的A是無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織，C、D正確。