Question

3．（1）腐乳、泡菜等是利用微生物制作的傳統(tǒng)發(fā)酵食品．
①腐乳是用豆腐發(fā)酵制成的，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉．
在腐乳的制作過(guò)程中，從微生物培養(yǎng)的角度來(lái)看，豆腐應(yīng)該是培養(yǎng)基．
②鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右．
③制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是亞硝酸鹽含量低．制備泡菜的鹽水應(yīng)煮沸后冷卻使用．冷卻后再使用的目的是保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響
（2）研究者初步篩選到能合成纖維素酶的菌株MC-1，并對(duì)該菌株進(jìn)行鑒定．
①為了獲得能合成纖維素酶的單菌落，可采用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
②關(guān)于制備固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是D．
A制作固體培養(yǎng)基時(shí)可以加入瓊脂
B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置
C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板
D．操作的順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌
③下表的培養(yǎng)液pH均為4.8，若對(duì)MC-1中纖維素酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則不能選擇表中的A、B、C培養(yǎng)液．（多選）

培養(yǎng)液	纖維素	纖維素酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4•7H2O	FeSO4
A	25g/L	-	-	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	-	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1μg/L	-	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

④某同學(xué)在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌．若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．

Answer 1

分析 1、腐乳的制作原理：
（1）腐乳的發(fā)酵在多種微生物的協(xié)同作用下進(jìn)行，其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型．
（2）毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法：
①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
3、培養(yǎng)基按功能分：

種類(lèi)	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

解答 解：（1）①腐乳是用豆腐發(fā)酵制成的，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉．在腐乳的制作過(guò)程中，豆腐相當(dāng)于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基．
②鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，鹵湯中的酒的含量一般控制在12%左右，因?yàn)榫凭�含量低時(shí)不足以殺菌，含量高時(shí)會(huì)延長(zhǎng)腐乳成熟的時(shí)間．
③制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是亞硝酸鹽含量低．制備泡菜的鹽水應(yīng)煮沸后冷卻使用，目的是保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響．
（2）①純化微生物常用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法；為了獲得能合成纖維素酶的菌株MC-1，應(yīng)該用選擇培養(yǎng)基．
②A．制作固體培養(yǎng)基時(shí)可以加入凝固劑--瓊脂，A正確；
B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置，B正確；
C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板，C正確；
D．操作的順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板，D錯(cuò)誤．
故選：D．
③分析題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是菌株MC-1中纖維素酶的活力，因此所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基的基本成分應(yīng)包括碳源，氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，分析性表格中的培養(yǎng)基的成分可知，A培養(yǎng)基缺乏氮源，微生物不能生長(zhǎng)；B沒(méi)有碳源，微生物應(yīng)為無(wú)法生長(zhǎng)，C不是以纖維素為唯一碳源，牛肉膏也可以作為碳源，因此A、B、C不能用于對(duì)MC-1中纖維素酶的活力進(jìn)行測(cè)定的培養(yǎng)基．
④在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．
故答案為：
（1）①毛霉    培養(yǎng)基    ②12%    ③亞硝酸鹽含量低    保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響
（2）①平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板      選擇    ②D    ③A、B、C     ④酚紅    剛果紅

點(diǎn)評(píng) 本題考查腐乳的制作、微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記參與腐乳制作的微生物及其代謝類(lèi)型，掌握腐乳制作的原理及條件；識(shí)記分離微生物的兩種常用方法，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．