Question

【題目】乳腺癌發(fā)生是一種生長(zhǎng)因子能與乳腺細(xì)胞表面的受體 HER2 蛋白結(jié)合，結(jié)果導(dǎo)致癌癥發(fā)生。超過 20%乳腺癌被證實(shí)過度表達(dá)了這種與生長(zhǎng)因子結(jié)合的受體 HER2 蛋白。研究人員將細(xì)菌進(jìn)行基因工程改造生產(chǎn)的某單克隆抗體對(duì)乳腺癌細(xì)胞表面的受體 HER2 蛋白結(jié)合可使細(xì)胞死亡。根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料和用具驗(yàn)證某單克隆抗體上述效果，請(qǐng)你完善實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析。

材料與用具：人乳腺癌細(xì)胞（過度表達(dá)了HER2 蛋白）、細(xì)胞培養(yǎng)液、某單克隆抗體、血清抗體（含有 HER2 蛋白的抗體）、培養(yǎng)瓶等。（要求與說明：實(shí)驗(yàn)儀器、試劑、用具操作、培養(yǎng)條件、檢測(cè)活細(xì)胞方法等不作具體要求）

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①實(shí)驗(yàn)分組：________________。每組設(shè)置若干個(gè)重復(fù)樣品。

②_____。

③_____。

④在培養(yǎng)過程中，每隔一段時(shí)間，重復(fù)②。

⑤對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析與處理。

（2）以細(xì)胞存活率（細(xì)胞存活率=實(shí)驗(yàn)組活細(xì)胞數(shù)/ 對(duì)照組活細(xì)胞數(shù)，對(duì)照組細(xì)胞存活率為 1）為指標(biāo)，設(shè)計(jì)一個(gè)坐標(biāo)，用曲線圖預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：__________________。

（3）某些化學(xué)物質(zhì)被認(rèn)為能引發(fā)癌癥被稱為致癌物， Bruse Ames 發(fā)明的埃姆斯檢測(cè)法是檢驗(yàn)?zāi)撤N化學(xué)物質(zhì)是否能誘發(fā)突變的簡(jiǎn)便易行方法如圖所示。

（注：大鼠肝臟提取物提供致癌物誘發(fā)突變所需的酶）

①埃姆斯檢測(cè)法采用的材料是一株組氨酸合成基因被破壞的沙門細(xì)菌，不能在缺少組氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只有_____的菌株才能在上述培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，這一誘發(fā)突變稱回復(fù)突變。

②該實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)指標(biāo)是_____，若該值越大，說明致癌物回復(fù)突變發(fā)生的頻率越________。

Answer 1

【答案】①實(shí)驗(yàn)分組：

甲組：細(xì)胞培養(yǎng)液+人乳腺癌細(xì)胞+適量血清抗體

乙組：細(xì)胞培養(yǎng)液+人乳腺癌細(xì)胞+等量某單克隆抗體

丙組：細(xì)胞培養(yǎng)液+人乳腺癌細(xì)胞 ②測(cè)定三組培養(yǎng)瓶中乳腺癌細(xì)胞的數(shù)量，并記錄 ③將三組人乳腺癌細(xì)胞放在相同且適宜條件下培養(yǎng) ①恢復(fù)組氨酸合成能力 ②不含組氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù) 高

【解析】

癌細(xì)胞的主要特征是能夠無限增殖，形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，細(xì)胞表面發(fā)生了變化。原癌基因和抑癌基因普遍存在于人和動(dòng)物的染色體上，原癌基因調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的過程；抑癌基因主要是阻止細(xì)胞不正常的增殖。轉(zhuǎn)基因技術(shù)能導(dǎo)入受體細(xì)胞的原因是DNA分子結(jié)構(gòu)具有特異性，能表達(dá)的原因是生物共用一套遺傳密碼子。

（1）分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是抗體的種類，因此需不加抗體、血清抗體、某單克隆抗體三組；測(cè)定初始溶液中細(xì)胞數(shù)量并記錄，相同且適宜環(huán)境下培養(yǎng)一段時(shí)間后，再次檢測(cè)細(xì)胞的數(shù)量并記錄（重復(fù)多次，以排除實(shí)驗(yàn)誤差），記錄并分析相應(yīng)數(shù)據(jù)。

（2）作圖注意三要素：標(biāo)題、橫縱坐標(biāo)、曲線趨勢(shì)。對(duì)照組細(xì)胞存活率為1必需標(biāo)注。某單克隆抗體比一般血清抗體優(yōu)越得多，原因是一般血清抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混合物。則某單克隆抗體組乳腺癌細(xì)胞死亡較多，血清抗體組乳腺癌細(xì)胞死亡較少，根據(jù)小題信息“細(xì)胞存活率=實(shí)驗(yàn)組活細(xì)胞數(shù)/對(duì)照組活細(xì)胞數(shù)，對(duì)照組細(xì)胞存活率為1”，則某單克隆抗體組減小最快，血清抗體組減小比某單克隆抗體組慢，對(duì)照組細(xì)胞存活率為1,如圖。

（3）讀圖明確埃姆斯檢測(cè)法并加以運(yùn)用。材料是一株組氨酸合成基因被破壞的沙門細(xì)菌，不能在缺少組氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只有恢復(fù)組氨酸合成能力的菌株才能在上述培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，也就是在致癌物的作用下誘發(fā)基因突變，這一基因表達(dá)的產(chǎn)物能使該菌在無組氨酸的培養(yǎng)使基上生長(zhǎng)并產(chǎn)生菌落，所以觀測(cè)指標(biāo)是不含組氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)，而且菌落數(shù)越多，表示致癌物回復(fù)突變發(fā)生的頻率越高。