Question

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)．請(qǐng)分析回答．
（1）如圖是利用

 

法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步

 

分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄?7H₂O、KCl、H₂O．若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述

 

成分，并加入

 

物質(zhì)，以補(bǔ)充

 

源．
（3）四位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量．在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是

 

．
A．一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是23
B．兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是22和26，取平均值24
C．三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26
D．四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25
（4）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為10⁵的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL）

 

．
（5）用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量

 

，因?yàn)?div id="1i45zug" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．
（6）某同學(xué)在測(cè)定大腸桿菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？

 

，為什么？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),測(cè)定某種微生物的數(shù)量

專(zhuān)題：

分析：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法．若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法．稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．

解答： 解：（1）由圖可知，其采取的是平板劃線(xiàn)法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，其氮源是尿素，所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì)，即去除NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源．
（3）A只涂布了一個(gè)平板，B只涂布了兩個(gè)平板，這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)服力不夠；C其中一個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明操作過(guò)程出現(xiàn)錯(cuò)誤，數(shù)據(jù)缺乏真實(shí)性，因此正確可信的是D．
（4）在稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL） 中的菌落數(shù)是=10⁵×23.4×

1

0.2

=1.17×10⁸個(gè)．
（5）當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察的是一個(gè)菌落，因此用這種方法測(cè)定得密度偏低．
（6）培養(yǎng)基上有其他雜菌的菌落，不能肯定是該大腸桿菌的品系被污染，因?yàn)椴荒芘懦�雜菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程．
故答案為：
（1）平板劃線(xiàn)    稀釋
（2）NaNO₃    尿素和葡萄糖    氮、碳
（3）D
（4）1.17×10⁸
（5）多    　當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察的是一個(gè)菌落       
（6）不能    因?yàn)椴荒芘懦�雜菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程

點(diǎn)評(píng)：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測(cè)定某種微生物的數(shù)量等知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分和微生物的接種方法，并能準(zhǔn)確判斷圖中的接種方法；能采用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和簡(jiǎn)單的計(jì)算．