Question

【題目】科學(xué)家采用轉(zhuǎn)基因體細胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人—抗胰蛋白酶，其技術(shù)路線如圖：

回答下列問題：

（1）基因表達載體應(yīng)當(dāng)包括______，構(gòu)建基因表達載體常用的酶是______，常用載體有________。

（2）核移植的受體應(yīng)選用______期卵母細胞，之后通過______（寫出一種具體方法）激活受體細胞使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。

（3）進行胚胎移植時，胚胎應(yīng)發(fā)育到______階段，移植的方法有______。為一次性獲得多個體，可使用胚胎分割技術(shù)，在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意________。

Answer 1

【答案】啟動子、終止子、目的基因 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒 MⅡ 電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑 桑椹胚或囊胚 手術(shù)法和非手術(shù)法 將內(nèi)細胞團均等分割

【解析】

（1）基因表達載體的構(gòu)建（基因工程的核心）目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。組成：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點；啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)；標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來；（2）動物核移植是將動物的一個細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。原理：動物細胞核具有全能性；（3）胚胎移植是指將雌性動物體內(nèi)的早期胚胎，或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。（4）分析題圖可知：轉(zhuǎn)基因綿羊涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植、胚胎移植，據(jù)此答題。

（1）基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等；構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；常用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（2）動物細胞的核移植到一個去核的MII卵母細胞中；核移植的過程中，用物理或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。

（3）進行胚胎移植時，胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，移植的方法有手術(shù)法和非手術(shù)法。為一次性獲得多個體，可使用胚胎分割技術(shù)，在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。