Question

【題目】下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請據圖回答下列問題。

(1) 若限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，那么在①過程中，應用限制酶____________切割質粒，用限制酶___________切割抗蟲基因。①過程在__________(填“體內”或“體外”)進行。

(2) 通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有_______的培養(yǎng)基上，若大腸桿菌能夠生長說明已導入了普通質粒或重組質粒，反之則說明沒有導入。

(3) 為在短時間內大量獲得目的基因，可用_____技術進行擴增，其原理是_____。

(4) ⑤過程所用技術稱為_____，從遺傳學角度來看，根本原因是根細胞具有_____。

Answer 1

【答案】ⅡⅠ(Ⅰ和Ⅱ)體外四環(huán)素PCRDNA復制植物組織培養(yǎng)　發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質

【解析】

對圖進行分析可知，①表示構建基因表達載體；②表示將重組質粒導入大腸桿菌細胞內；③表示將大腸桿菌中的質粒轉化到農桿菌中；④表示農桿菌轉化法是將目的基因導入植物細胞；⑤表示通過組織培養(yǎng)技術把根細胞培養(yǎng)成完整植物體。

（1）由圖可知，質粒上的兩個標記基因中均有限制酶Ⅰ（—↓GATC—）的識別序列和切點，若用該酶切割會將兩個標記基因均破壞。限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，用酶Ⅱ切割質粒，氨芐青霉素抗性基因會被破壞，而四環(huán)素抗性基因是完好的。因此，只能用限制酶Ⅱ切割質粒。切割含有抗蟲基因的外源DNA分子時可以只用限制酶Ⅰ，也可以同時用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ。限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，因此用限制酶Ⅱ割后所形成的黏性末端是。①表示在體外進行基因表達載體的構建過程，該過程還需要用DNA連接酶將目的基因和質粒連接形成重組質粒。

（2）用限制酶Ⅱ切割質粒后會破壞氨芐青霉素抗性基因，不會破壞四環(huán)素抗性基因，因此能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的大腸桿菌已經成功導入普通質�；蛑亟M質粒，反之則說明沒有導入。

（3）PCR技術是以DNA或RNA為模板進行核酸的體外擴增技術，其原理是DNA的半保留復制。因此，可用PCR技術進行擴增目的基因，在短時間內大量獲得目的基因。

(4) ⑤表示通過組織培養(yǎng)技術把根細胞培養(yǎng)成完整植物體。植物的組織培養(yǎng)是利用植物細胞的全能性原理。植物細胞的全能性是指植物體的每個具有完整細胞核的細胞，都具有該植物的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的潛在能力。