Question

【題目】據(jù)新華社呼和浩特2010年4月20日電，內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實驗動物研究中心的科研人員成功培育出了國際上規(guī)模最大的一批轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊。研究過程中，科研人員首先成功構(gòu)建了對絨毛生長有促進作用的轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGF－Ⅰ)基因載體，利用該載體成功轉(zhuǎn)載了絨山羊胎兒成纖維細胞，建立起轉(zhuǎn)基因細胞系。再利用轉(zhuǎn)基因細胞進行體細胞克隆，從而獲得了轉(zhuǎn)基因絨山羊。請回答下列問題：
（1）科研人員構(gòu)建轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGF－Ⅰ)基因載體的過程中必需用到的工具酶有。
（2）用絨山羊胎兒成纖維細胞建立轉(zhuǎn)基因細胞系必須用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，動物細胞培養(yǎng)中除含葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素外，還必須加入的成分是。在動物細胞培養(yǎng)過程中要不停地使用的一種工具酶是 ， 目的是使細胞分散開。
（3）轉(zhuǎn)基因絨山羊的培育過程大致為：將轉(zhuǎn)基因細胞的注入普通絨山羊的卵細胞中，經(jīng)過某種刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，將該胚胎移入代孕母絨山羊的中，通過培育可達到目的。
（4）胚胎移植是胚胎工程及其他工程的最后一道工序，可以充分發(fā)揮。供體的主要職能是 ， 而受體則承擔(dān)妊娠和育仔的任務(wù)。在實施該技術(shù)時，要用激素對供、受體進行處理，使它們。為了提高胚胎利用率，可采用胚胎分割技術(shù)，用于分割的胚胎應(yīng)是階段的胚胎。

Answer 1

【答案】
（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶
（2）動物血清；胰蛋白酶
（3）細胞核；去核；子宮
（4）雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力；產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎；同期發(fā)情；發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚或桑椹胚
【解析】解：(1)由題意可知，構(gòu)建轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGFⅠ)基因載體(即目的基因與運載體結(jié)合)的過程中，要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種工具酶。(2)動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中必須有動物血清，在培養(yǎng)過程中為使細胞分散開來，常用胰蛋白酶進行處理。(3)要培育出轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊，應(yīng)將轉(zhuǎn)基因細胞的細胞核移入去核的成熟卵細胞內(nèi)，經(jīng)體外培養(yǎng)形成初期胚胎后再植入母山羊的子宮內(nèi)發(fā)育。(4)胚胎移植是胚胎工程及其他工程的最后一道工序，可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。供體的主要職能是只提供優(yōu)良的胚胎，而受體則承擔(dān)妊娠和育仔的任務(wù)。在實施該技術(shù)時，要用激素對供、受體進行處理，使它們同期發(fā)情。為了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割移植技術(shù)，用于分割的胚胎應(yīng)是發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚階段的胚胎。
【考點精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)，以及對動物細胞與組織培養(yǎng)過程的理解，了解取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．