Question

【題目】痤瘡丙酸桿菌引發(fā)免疫反應(yīng)造成了青春痘，某公司靶向定位細菌內(nèi)CAMP基因，該基因編碼CAMP蛋白對宿主細胞有殺傷作用。若CAMP抗體與細菌產(chǎn)生的CAMP蛋白相結(jié)合，即可抑制該細菌對宿主細胞的影響。其研究流程如下：

（1）不能將CAMP基因直接導(dǎo)入蘿卜細胞的原因是___________，因此需構(gòu)建_________，將基因表達載體導(dǎo)入蘿卜細胞的常用方法是___________，其中用作運載體的是___________________。

（2）檢測在蘿卜細胞中CAMP基因是否編碼產(chǎn)生CAMP蛋白，應(yīng)用__________方法，若出現(xiàn)__________，則說明該基因能正常表達。

（3）現(xiàn)該公司預(yù)生產(chǎn)特異性強、靈敏度高并可大量制備的CAMP蛋白抗體，應(yīng)采用_________技術(shù)，最終可在細胞培養(yǎng)液或____________中獲取CAMP蛋白抗體。

Answer 1

【答案】（1）目的基因不能在蘿卜細胞穩(wěn)定存在和表達 基因表達載體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 Ti質(zhì)粒

（2）抗原-抗體雜交 雜交帶

（3）生產(chǎn)單克隆抗體 小鼠腹水

【解析】

試題分析：（1）CAMP基因為目的基因，若將目的基因直接導(dǎo)入受體細胞（蘿卜細胞），則目的基因不能在蘿卜細胞穩(wěn)定存在和表達，所以不能將CAMP基因直接導(dǎo)入蘿卜細胞，因此需構(gòu)建基因表達載體。將基因表達載體導(dǎo)入蘿卜細胞的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中用作運載體的是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒。

（2）檢測目的基因（CAMP基因）是否編碼產(chǎn)生蛋白質(zhì)（CAMP蛋白），應(yīng)用抗原—抗體雜交方法，若出現(xiàn)雜交帶，則說明該基因能正常表達。

（3）單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高并可大量制備的優(yōu)點。若生產(chǎn)特異性強、靈敏度高并可大量制備的CAMP蛋白抗體，則應(yīng)采用生產(chǎn)單克隆抗體技術(shù)，最終可在細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取CAMP蛋白抗體。