Question

2．為提高我國(guó)稻米的含鐵量，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)將菜豆的鐵結(jié)合蛋白基因?qū)�入了一個(gè)高產(chǎn)粳稻品種中，獲得了高含鐵量轉(zhuǎn)基因水稻株系．如圖為培育過(guò)程．請(qǐng)分析并回答問(wèn)題：
（1）獲取重組載體用到的“手術(shù)刀”是限制酶，②過(guò)程通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組載體導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞．
（2）重組載體中標(biāo)記基因的作用是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞．檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，需用同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因作探針．
（3）圖中①③④過(guò)程須在無(wú)菌條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加植物激素，作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、分化．
（4）過(guò)程④除了用秋水仙素或低溫誘導(dǎo)來(lái)處理，還可以采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)常用的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇（PEG）．
（5）上述培育轉(zhuǎn)基因水稻的操作過(guò)程中最為核心的步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．

Answer 1

分析 分析圖解：該轉(zhuǎn)基因水稻的獲得過(guò)程為：首先獲取目的基因即鐵結(jié)合蛋白基因，然后構(gòu)建基因表達(dá)載體；同時(shí)通過(guò)①花藥離體培養(yǎng)的方法獲得愈傷組織；并②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，通過(guò)③再分化過(guò)程培養(yǎng)成為胚狀體，最后④利用秋水仙素使細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍，繼而培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株，再進(jìn)行目的基因的鑒定．

解答 解：（1）獲取重組載體用到的“手術(shù)刀”是限制性核酸內(nèi)切酶．由圖可知，②過(guò)程通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組載體導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞．
（2）重組載體中的標(biāo)記基因的作用是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞．檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，需用同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因作探針，然后再采用分子雜交法．
（3）圖中基因工程的操作以及植物的組織培養(yǎng)過(guò)程須在無(wú)菌條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加植物激素，作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、分化．
（4）由于花藥培養(yǎng)出的細(xì)胞染色體是體細(xì)胞的一般，因此過(guò)程④用秋水仙素或低溫誘導(dǎo)來(lái)處理是為了讓細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍，該過(guò)程還可以采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)常用的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇．
（5）上述培育轉(zhuǎn)基因水稻采用了基因工程技術(shù)，其核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
故答案為：
（1）限制酶    愈傷組織
（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞   同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因
（3）無(wú)菌    促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長(zhǎng)、分化
（4）植物體細(xì)胞雜交   聚乙二醇（PEG）
（5）基因表達(dá)載體的構(gòu)建

點(diǎn)評(píng) 本題綜合考查了基因工程、細(xì)胞工程等有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作工具、目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法、目的基因檢測(cè)與鑒定的方法；明確秋水仙素作用的結(jié)果；識(shí)記植物組織培養(yǎng)過(guò)程中植物激素的作用等．