Question

9．回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：
（1）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂長年到細(xì)胞表面時，細(xì)胞會停止分裂增增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．此時，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層（或一層）．要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是胰蛋白酶．
（2）隨首細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變面變成細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性降低，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)減少（糖蛋白）的量．
（3）現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時，觀察到死細(xì)胞被污色，而活細(xì)胞不染色，原因是由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色．
（4）檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用中細(xì)胞分裂到期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察．
（5）給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原進(jìn)行攻擊．

Answer 1

分析 1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁．細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
3、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境；②營養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．

解答 解：（1）細(xì)胞的接觸抑制：細(xì)胞表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖．由于接觸抑制，動物細(xì)胞培養(yǎng)時，瓶壁上只能形成的單層細(xì)胞．可以用胰蛋白酶處理使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來．
（2）隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改（3）由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，所以用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不能被染色．變而變成不死性細(xì)胞，該種細(xì)胞的細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）減少，細(xì)胞的黏著性降低．
（4）有絲分裂中期，細(xì)胞中染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，是觀察染色體的最佳時期．所以檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到中期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察．
（5）器官移植后發(fā)生排斥反應(yīng)由于機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原進(jìn)行攻擊導(dǎo)致的．
故答案為：
（1）相互接觸接觸抑制單層（或一層）胰蛋白酶
（2）衰老甚至死亡    不死性    降低   減少
（3）由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色（或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色）
（4）中
（5）抗原

點(diǎn)評 本題綜合考查動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞膜的特點(diǎn)、細(xì)胞有絲分裂不同時期的特征、細(xì)胞保持及免疫的相關(guān)知識，重點(diǎn)考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求考生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件和應(yīng)用等知識，能靈活的運(yùn)用所學(xué)的知識解答問題．