Question

13．我國最早的詩集《詩經》中有“田中有廬，疆場有瓜是剝是菹”的詩句，其中“廬”和“瓜”是蔬菜，“剝”和“菹”是腌制加工的意思．泡菜是一種歷史悠久、深受群眾喜愛的傳統(tǒng)美食．某興趣小組的同學進行了制作泡菜的實踐活動．
回答下列問題：
（1）按清水與鹽質量比為4：1的比例制好鹽水后，需將鹽水煮沸，其作用是除去鹽水中的氧氣和殺菌．
（2）為測定泡菜中亞硝酸鹽含量，首先要配制煙硝酸鹽標準顯色液，并與樣品進行比較．泡菜制作的第3-5天亞硝酸鹽含量較高不宜食用，原因是適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉變成致癌物質亞硝胺．
（3）若將稀釋10⁵倍的某細菌菌液，用直接計數法和稀釋涂布平板法進行計數．
①直接計數法：用吸管吸取0.1ml該菌液，滴于血球計數板上的蓋玻片邊緣，待該細菌全部沉降到計數室底部，用顯微鏡直接計數，并計算出每升菌液的細菌數目．
②稀釋涂布平板法計數：在五個固體培養(yǎng)基上分別接種0.1ml該細菌菌液，適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上的菌落數分別為：20、40、152、154、156，則每升菌液中細菌數量為1.255×10¹¹個．
③正常操作情況下，上述兩種計數法中，直接計數法統(tǒng)計獲得的細菌數量數目偏多，原因是直接計數法無論菌體死活均被計數，而稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．

Answer 1

分析 1、測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．
2、統(tǒng)計菌落數目的方法
（1）顯微鏡直接計數法
 ①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數； ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計數法（活菌計數法）
 ①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統(tǒng)計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性．
b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數．
③計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數．

解答 解：（1）按清水與鹽質量比為4：1的比例制好鹽水后，需將鹽水煮沸，其作用是除去鹽水中的氧氣和殺菌．
（2）為測定泡菜中亞硝酸鹽含量，首先要配制煙硝酸鹽標準顯色液，并與樣品進行比較．泡菜制作的第3-5天亞硝酸鹽含量較高不宜食用，原因是適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉變成致癌物質亞硝胺．
（3）若將稀釋10⁵倍的某細菌菌液，用直接計數法和稀釋涂布平板法進行計數．
①采用直接計數法時，應該先蓋蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液．
②采用稀釋涂布平板法計數時，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數，因此每升菌液中細菌數量=（40+154+156+152）÷4÷0.1×10⁵×10³=1.255×10¹¹個．
③由于直接計數法無論菌體死活均被計數，而稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，上述兩種計數法中，直接計數法統(tǒng)計獲得的細菌數量數目偏多，而稀釋涂布平板法統(tǒng)計獲得的細菌數量偏少．
故答案為：
（1）除去鹽水中的氧氣和殺菌
（2）煙硝酸鹽    適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉變成致癌物質亞硝胺
（3）①蓋玻片
②1.255×10¹¹
③直接計數法    直接計數法無論菌體死活均被計數，而稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、泡菜的制作，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法，掌握計數微生物的方法及注意事項；識記測定亞硝酸鹽含量的原理，能結合所學的知識準確答題．