Question

12．基因工程技術(shù)又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問(wèn)題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即人工合成和從生物材料中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)，兩個(gè)文庫(kù)相比，cDNA文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少，其原因是cDNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄（或已表達(dá)）的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因．
（3）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位．若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌（或答細(xì)菌）．
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞時(shí)，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．

Answer 1

分析 1、基因文庫(kù)是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因．
基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因；部分基因文庫(kù)包含某種生物的部分基因．如：cDNA文庫(kù)．
2、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
3、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
4、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：
①過(guò)程：用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，再用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子．
②目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用．
③基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因
（1）啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；
（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；
（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即人工合成和從生物材料中分離，人工合成可通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法或人工化學(xué)合成法，從生物材料中分離即通過(guò)基因文庫(kù)法．
（2）由于cDNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄（或已表達(dá)）的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因，故兩個(gè)文庫(kù)相比，cDNA文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少．
（3）基因表達(dá)載體的組成包括目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位；若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，由于細(xì)菌繁殖速度快，故最常用的原核生物是大腸桿菌等細(xì)菌．
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
故答案為：
（1）人工合成   生物材料  
（2）cDNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄（或已表達(dá)）的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因
（3）RNA    大腸桿菌（或答細(xì)菌）
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確解答，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．