Question

【題目】基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。

⑴根據(jù)已知條件和圖回答下列問題：

①上述質(zhì)粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶__________切割。

②將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，還要加入適量的__________。

③請指出質(zhì)粒上至少要有一個標記基因的理由：_____________________。

⑵不同生物的基因可以拼接的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是____________________________________。

⑶利用PCR技術(shù)可獲取目的基因，據(jù)圖回答下列問題：

①PCR技術(shù)的原理是_____________，利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是_____________。

②由圖中信息分析可知，催化C過程的酶是_______，它與正常細胞里的酶的區(qū)別是_________。

Answer 1

【答案】 Ⅰ Ⅱ DNA連接酶 檢測重組質(zhì)粒(或目的基因)是否導入受體細胞 DNA結(jié)構(gòu)基本相同 DNA分子半保留復制 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 DNA聚合酶 能耐高溫

【解析】試題分析：本題考查基因工程相關(guān)知識，限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-，可知限制酶II能夠識別和切割限制酶I切割后的黏性末端。

⑴①據(jù)題圖可知，目的基因兩端分別是限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-和限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-，只有用限制酶II才能將目的基因切割下來。

②將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，要用DNA連接酶連接。

③標記基因的存在是為了方便篩選出成功導入的重組質(zhì)粒。

⑵不同生物的基因可以拼接的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是DNA結(jié)構(gòu)基本相同。

⑶①PCR技術(shù)的原理是DNA分子半保留復制，利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。

②C過程為DNA合成，該過程需要的酶是DNA聚合酶 ，它的作用環(huán)境是72攝氏度左右，故其與正常細胞里的酶的區(qū)別是能耐高溫。