Question

4．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答．

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000mL．
（1）按物理性質(zhì)分，此培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是，篩選目的菌這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖，實驗需要振蕩原因是為目的菌提供氧氣．
（4）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，可采用平板劃線法（或稀釋涂布平板法）接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是①和②，需要消毒的是③．（填序號）
①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻棒、試管、錐形瓶和吸管
③實驗操作者的雙手
（6）在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落．A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有①②③（填序號）．
①土樣不同                             ②培養(yǎng)基污染
③操作失誤                             ④沒有設(shè)置對照．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

解答 解：（1）瓊脂是凝固劑，因此此培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基．
（2）該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細菌（目的菌）．不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素，碳源來自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)，為目的菌提供氧氣．
（4）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，常采用涂布平板（劃線）的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）在實驗中，①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌，③實驗操作者的雙手需要消毒．
（6）該同學與其他同學獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實驗過程中沒有進行無菌操作．
故答案為：
（1）固體培養(yǎng)基
（2）篩選目的菌  選擇
（3）尿素  葡萄糖  為目的菌提供氧氣
（4）平板劃線法 （或 稀釋涂布平板法）
（5）①和②③
（6）①②③

點評 本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識，考生要明確選擇培養(yǎng)基的選擇作用；識記培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分；識記常用的接種方法和具體操作過程；特別注意滅菌和消毒的對象和區(qū)別．