Question

17．近十年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如圖），在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體．

（1）PCR技術(shù)能把某一DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增，依據(jù)的原理是：DNA分子具有雙螺旋結(jié)構(gòu)和DNA分子中堿基的互補(bǔ)配對(duì)
（2）加熱使DNA雙鏈打開，這一步是打開氫鍵，稱為解旋，在細(xì)胞中是在解旋酶的作用下使此鍵斷裂．
（3）當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板3’端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個(gè)DNA分子，此過程中加入四種脫氧核苷三磷酸的目的是既是原料，又能提供能量，遵循的原則是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則．
（4）PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還需要三個(gè)條件．即：液體環(huán)境、適宜的溫度和酸堿度．
（5）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、退火、延伸三個(gè)步驟．

Answer 1

分析 PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開．

解答 解：（1）PCR技術(shù)能把某一DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增，依據(jù)的原理是：DNA分子具有雙螺旋結(jié)構(gòu)和DNA分子中堿基的互補(bǔ)配對(duì)．
（2）加熱使DNA雙鏈打開，這一步是打開氫鍵，稱為解旋，在細(xì)胞中是在解旋酶的作用下使此鍵斷裂．
（3）當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板3’端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個(gè)DNA分子，此過程中加入四種脫氧核苷三磷酸的目的是既是原料，又能提供能量，遵循的原則是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則．
（4）PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還需要三個(gè)條件．即：液體環(huán)境、適宜的溫度和酸堿度．
（5）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、退火、延伸三個(gè)步驟．
故答案為：
（1）DNA分子具有雙螺旋結(jié)構(gòu)和DNA分子中堿基的互補(bǔ)配對(duì)
（2）氫    解旋    解旋酶
（3）3’既是原料，又能提供能量   堿基互補(bǔ)配對(duì)原則
（4）溫度    酸堿度
（5）變性、退火和延伸

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的概念、原理、條件及過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．