Question

14．家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥．
（1）進行轉基因操作前，需用胰蛋白（或膠原蛋白）酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
（3）采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經導入家蠶細胞．該PCR反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和Taq 酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
2、PCR技術的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等．

解答 解：（1）為了使動物組織分散開為單個細胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理．
（2）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因．啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．
（3）PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和一對DNA引物；在PCR反應過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用讓引物結合到互補DNA鏈上，形成局部雙鏈．
故答案為：
（1）胰蛋白（或膠原蛋白）　
（2）啟動子　終止子
（3）脫氧核糖核苷酸  引物　Taq 酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）

點評 本題考查基因工程、細胞工程等相關知識，著重識記動物細胞培養(yǎng)和PCR技術的有關內容，意在考查考生的識記能力和應用能力，屬于容易題．