Question

（16分）傳統(tǒng)藥用植物栝樓的根、果、種子等均能入藥，其合成的天花粉蛋白是中藥天花粉的主要有效成分�，F(xiàn)科研人員進(jìn)行以下的研究，大致流程如下：

（1）接種在MS培養(yǎng)基中的栝樓種子，如先經(jīng)加水浸沒的萌發(fā)率為75%，不加水浸沒的萌發(fā)率為2.5%，說明栝樓種子萌發(fā)需要 。

（2）在培育“無菌苗”過程中，使用的部分激素組合如表1（注：—表示未添加該種植物激素），除甲組僅有頂芽長成小苗外，所有的培養(yǎng)基上都有腋芽長出，可見誘導(dǎo)腋芽生長加入 是必需的。

（3）在誘導(dǎo)“愈傷組織”的MS培養(yǎng)基中，使用了以下一些激素組合（如表2），以上培養(yǎng)基均能誘導(dǎo)葉盤緩慢長出黃綠色的愈傷組織，其中組B2和組B3誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)30天后分化出小芽點(diǎn)，并迅速長大成無根苗，兩組的分化率分別為25.0%和14.3%�？梢�0.2mg/LNAA與激動(dòng)素(6-BA等)配合可誘導(dǎo)栝樓葉片 長出愈傷組織，但不利于誘導(dǎo)愈傷組織 。

（4）科研人員從組培、栽培、野生栝樓的根中提取了總蛋白，并進(jìn)行了分離與純化及精細(xì)分析，不同來源的根的蛋白質(zhì)帶型差異較大。鑒定蛋白質(zhì)純度常用 方法。分析結(jié)果顯示，栽培（移栽成活1個(gè)月的組培苗）和野生栝樓的根都檢測(cè)到了與對(duì)照天花粉蛋白相對(duì)應(yīng)的 ，說明 基因在兩種來源的栝樓根細(xì)胞中的表達(dá)情況相同；而組培根中未觀察到任何明顯的雜交條帶，說明該基因的表達(dá)可能還需要 。

Answer 1

（1）充足的水分（水分、水）

（2）6—BA或NAA或6—BA和NAA（植物激素）

（3）脫分化 再分化

（4）凝膠電泳（SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳） 特異性蛋白質(zhì)帶型或特異性條帶 天花粉蛋白 一定的外界（環(huán)境）誘導(dǎo)條件（受一定的外界條件影響，受環(huán)境因素影響，）

【解析】

試題分析：

（1）從題意中可以看出，種子浸泡后萌發(fā)率提高，說明種子萌發(fā)過程中需要水分。

（2）比較表格中信息和實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以推測(cè)：只加入6—BA或NAA，或者6—BA和NAA二者均加入，都可以促進(jìn)腋芽的生長。

（3）A1、B1和C1組中都是0.2mg/LNAA與激動(dòng)素(6-BA等)配合，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，只出現(xiàn)愈傷組織，說明0.2mg/LNAA與激動(dòng)素(6-BA等)配合可以促進(jìn)脫分化過程，由于沒有長成幼苗，說明不利于再分化過程。

（4）鑒定和分離蛋白質(zhì)純度可以采用凝膠電泳法進(jìn)行分離；如果與對(duì)照組的特異性條帶相對(duì)應(yīng)，說明這兩種細(xì)胞中都有天花粉蛋白，同時(shí)說明天花粉蛋白基因在這兩種細(xì)胞中都得到了表達(dá)；組培根中沒有觀察到相應(yīng)的雜交條帶，說明天花粉蛋白基因的表達(dá)與外界環(huán)境因素有關(guān)。

考點(diǎn)：本題考查植物組織培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的提取和分離的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問題。