Question

【題目】某研究小組進(jìn)行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，如圖為他們前期研究工作的簡(jiǎn)要操作流程圖：

(1)實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是________；在步驟②之間擴(kuò)增H基因常采用的方法是___________。

(2)步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用的酶是____________。

(3)構(gòu)建重組表達(dá)載體時(shí)，一般需要將H基因與載體結(jié)合，常用作基因工程載體的是________；在檢測(cè)受體細(xì)胞中是否已經(jīng)導(dǎo)入目的基因時(shí)，常常要借助載體上________的表達(dá)。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 PCR(或多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù) 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 質(zhì)粒(或病毒) 標(biāo)記基因(或抗生素抗性基因)

【解析】

基因工程：按照人們的意愿，把一種生物的個(gè)別基因復(fù)制出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀；基因工程的步驟：①提取目的基因，②目的基因與運(yùn)載體結(jié)合（形成重組DNA分子），③將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，④目的基因的表達(dá)與檢測(cè)；基因工程技術(shù)的關(guān)鍵是構(gòu)建基因表達(dá)載體，它使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時(shí)使目的基因表達(dá)并發(fā)揮作用；基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶。

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①RNA→DNA所代表的反應(yīng)過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄；在步驟②之前擴(kuò)增H基因常采用的方法是PCR技術(shù)(或多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù))；

（2）需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體，故步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用的酶是限制酶(限制性內(nèi)切酶)和DNNA連接酶；

（3）構(gòu)建重組表達(dá)載體時(shí)，一般需要將H基因與載體結(jié)合，常用做基因工程載體的是質(zhì)粒(或病毒)；在檢測(cè)受體細(xì)胞中是否已經(jīng)導(dǎo)入目的基因時(shí)，常常要借助載體上標(biāo)記基因(或抗生素抗性基因)的表達(dá)。