Question

4．如圖為轉(zhuǎn)基因煙草培育過程流程圖，回答問題：
（1）攜帶外源基因的質(zhì)粒除了含有外源基因外，還包括啟動子、終止子復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因，其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（2）圖示過程中，將目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞使用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法法，①過程要用鈣離子處理農(nóng)桿菌，使之轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)，然后將它們在緩沖液中混合培養(yǎng)以完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）②過程叫做植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性．
（4）該轉(zhuǎn)基因煙草產(chǎn)生的配子中不一定（填“一定”或“不一定”）含有目的基因．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（l）基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（2）由圖可知，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．，①過程要先用 Ca²⁺處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程．
（3）將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性．
（4）由于導(dǎo)入的目的基因是單個的，不是成對的，所以該轉(zhuǎn)基因煙草產(chǎn)生的配子中不一定含有目的基因．
故答案為：
（1）啟動子 終止子 鑒別受體細(xì)胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 鈣離子
（3）植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞具有全能性
（4）不一定

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因煙草的培育過程圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程、條件及原理等基礎(chǔ)知識，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．