Question

16．請(qǐng)回答相關(guān)問題：
（1）利用月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體時(shí)，選材非常重要．為了選擇適宜時(shí)期的花藥，通常選擇完全未開放的花蕾，確定花粉發(fā)育時(shí)期常用的方法有醋酸洋紅法，但是對(duì)于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用焙花青鉻礬法，該法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色．
（2）消毒后的花蕾，在剝離花藥時(shí)，要徹底去除花絲，這是因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成
（3）對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮藥劑 的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力．對(duì)培養(yǎng)基和其他器械進(jìn)行滅菌的方式是高壓蒸汽滅菌．進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)，溫度控制在18～22度，并且每日用日光燈照射12h．
（4）若要進(jìn)行蘭花無病毒植株的培育，首先選擇蘭花的莖尖分生組織作為外植體．進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等激素．欲利于根的分化，植物激素的用量比例應(yīng)為生長(zhǎng)素多于細(xì)胞分裂素．

Answer 1

分析 植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性．培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽最終形成植物體．影響植物細(xì)胞脫分化產(chǎn)生愈傷組織的一個(gè)重要因素是植物激素．植物激素中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素．生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)．

解答 解：（1）材料的選擇是花粉植株能否培養(yǎng)成功的主要影響因素之一，同一植物的不同生理狀況誘導(dǎo)成功率都不相同，選擇月季花粉的最佳時(shí)期為完全未開放的花蕾．確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法，但是對(duì)于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用焙花青-鉻礬法，焙花青-鉻礬法藍(lán)黑色．
（2）滅菌后的花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成，所以在剝離花藥時(shí)，既要徹底除去花絲，又要盡量不要損傷花藥．
（3）無菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵，一般使用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；外植體消毒一般采用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液處理，但處理既要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力．進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)條件是：一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在18至22℃，并每天光照12h．
（4）若要進(jìn)行蘭花無病毒植株的培育，首先選擇蘭花莖尖分生組織作為外植體．原因是該部位含病毒少，甚至無病毒．植物組織培養(yǎng)過程中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素能促進(jìn)細(xì)胞分裂分化，在培養(yǎng)的不同時(shí)期對(duì)兩者的比例會(huì)有不同要求，在再分化過程中，生長(zhǎng)素高，促進(jìn)根的分化，細(xì)胞分裂素比例高，促進(jìn)芽的分化．
故答案為：
（1）完全未開放   　醋酸洋紅    焙花青鉻礬　  藍(lán)黑  
（2）與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成  
（3）藥劑  植物的耐受能力   高壓蒸汽滅菌    18～22   12
（4）莖尖分生組織　　  生長(zhǎng)素多于細(xì)胞分裂素

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查學(xué)生對(duì)植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)的記憶和理解能力．在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料．植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化．消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌．