Question

6．甘草酸是中藥甘草中最有效的成分，但含量較低．某研究小組制備出甘草酸單克隆杭體用于快速檢測微量的甘草酸．如圖是甘草酸單克隆抗體的制備過程示意圖，回答下列問題：

（1）物質(zhì)X是甘草酸，小鼠獲得免疫后可從脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞．
（2）甘草酸單克降抗體的制備過程所涉及的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)小鼠骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合可采用的生物方法是滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合．為維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，可向培養(yǎng)液中通入一定濃度的CO₂．
（3）圖中經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的細(xì)胞①還需要經(jīng)過專一抗體檢測陽性和克隆化培養(yǎng)的篩選過程，其目的是篩選出大量能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞．

Answer 1

分析 一、克隆抗體的制備過程：
1、細(xì)胞來源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖．
2、雜交瘤細(xì)胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
3、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
4、提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取
二、分析圖示：注射抗原后，誘導(dǎo)產(chǎn)生具有免疫能力的B細(xì)胞；將具有免疫能力的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得①雜交瘤細(xì)胞；用選擇性培養(yǎng)基獲得產(chǎn)生②單一抗體的雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）物質(zhì)X是抗原甘草酸，小鼠獲得免疫后可從脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞．
（2）甘草酸單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．主要運用的細(xì)胞工程技術(shù)包括①動物細(xì)胞培養(yǎng)和②動物細(xì)胞融合，原理依次是細(xì)胞的增殖、細(xì)胞膜具有一定的流動性．誘導(dǎo)小鼠骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合可采用的生物方法是滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合．為維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定，可向培養(yǎng)液中通入一定濃度的CO₂．
（3）圖中經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的細(xì)胞①還需要經(jīng)過專一抗體檢測陽性和克隆化培養(yǎng)的篩選過程，其目的是篩選出大量能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞．
故答案為：
（1）甘草酸
（2）細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖          滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合               CO₂
（3）專一抗體檢測陽性和克隆化培養(yǎng)             篩選出大量能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞

點評 本題考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識，意在考查考生獲取信息的能力，在學(xué)習(xí)單克隆抗體制備過程中，學(xué)會歸納總結(jié)：原理、細(xì)胞融合的方法、如何獲取具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞、兩次篩選的目的和產(chǎn)物、雜交瘤細(xì)胞的特點和單克隆抗體的特點、提取單克隆抗體的途徑等．