Question

6．干擾素是能夠抑制多種病毒復(fù)制的抗病毒物質(zhì)．科學(xué)家利用基因工程技術(shù)從人的T淋巴細(xì)胞中提取干擾素基因轉(zhuǎn)入羊的DNA中，培育出羊乳腺生物反應(yīng)器，使羊乳汁中含有人體干擾素．請(qǐng)回答：
（1）研究人員用DNA測序儀顯示了基因組的某DNA片段一條鏈的堿基排列順序圖片．其中圖1的堿基排列順序已經(jīng)解讀，其順序是：GGTTATGCGT，請(qǐng)解讀圖2顯示的堿基排列順序：GATGCGTTCG．
（2）科學(xué)家從相關(guān)基因組中獲取了干擾素基因，并采用PCR技術(shù)對(duì)干擾素基因進(jìn)行擴(kuò)增，然后將干擾素基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體．在重組載體的構(gòu)建過程中需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶．
（3）科學(xué)家將干擾素基因與羊乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導(dǎo)入羊的受精卵細(xì)胞中，通過系列操作培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物．
（4）如何檢測和鑒定目的基因已被成功導(dǎo)入羊體內(nèi)？請(qǐng)寫出兩種方法．
DNA分子雜交；DNA與mRNA分子雜交．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖1的堿基排列順序是：GGTTATGCGT，由此可知圖中堿基序列應(yīng)從下向上解讀，根據(jù)已知的堿基序列可知從左向右四種堿基依次是ACGT，所以圖2中堿基序列是GATGCGTTCG．
（2）可采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增目的基因（干擾素基因）；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子，其次還需要用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組DNA分子．
（3）基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；受精卵的全能性最高，因此培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，一般選用受精卵作為受體細(xì)胞．
（4）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)，②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）GATGCGTTCG
（2）PCR    限制酶、DNA連接酶
（3）乳腺蛋白    啟動(dòng)子    顯微注射法   受精卵    
（4）DNA分子雜交   DNA與mRNA分子雜交

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)及基因工程的應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．