Question

2．圖是利用基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得新植株的過(guò)程，請(qǐng)回答：

（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用限制酶．
（2）C→D過(guò)程需要使用鈣離子處理，使D處于一種能吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞．
（3）培養(yǎng)E需要添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，其目的是誘導(dǎo)細(xì)胞通過(guò)脫分化和再分化過(guò)程發(fā)育為完整植株，培養(yǎng)要求無(wú)菌操作的原因是如不進(jìn)行無(wú)菌操作，微生物會(huì)在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競(jìng)爭(zhēng)．
（4）植株組織培養(yǎng)過(guò)程中，判斷愈傷組織是否產(chǎn)生，依據(jù)是看是否產(chǎn)生了排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的細(xì)胞．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞 ④目的基因的檢測(cè)與鑒定．
2、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體．
3、將目的基因?qū)�入原核�?xì)胞，常用CaCl₂處理以增加細(xì)胞壁的通透性，變成感受態(tài)細(xì)胞，能吸收周?chē)�的DNA分子．

解答 解：（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒是擬核外環(huán)狀DNA分子，分布在細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用限制性?xún)?nèi)切酶切割．
（2）作為受體細(xì)胞，常用Ca²⁺處理法，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其處于一種能吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)．
（3）培養(yǎng)E需要添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，其目的是誘導(dǎo)細(xì)胞通過(guò)脫分化和再分化過(guò)程發(fā)育為完整植株，培養(yǎng)要求無(wú)菌操作的原因是如不進(jìn)行無(wú)菌操作，微生物會(huì)在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競(jìng)爭(zhēng)．
（4）判斷愈傷組織是否產(chǎn)生，依據(jù)是：看是否產(chǎn)生了排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的細(xì)胞．
故答案為：
（1）細(xì)胞質(zhì)  T-DNA  限制酶 
（2）鈣離子  感受態(tài)細(xì)胞
（3）脫分化和再分化  如不進(jìn)行無(wú)菌操作，微生物會(huì)在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競(jìng)爭(zhēng) 
（4）排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合操作過(guò)程示意圖考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．