Question

4．（一）有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株．回答問題．
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）篩選高效菌株時，可比較單菌落周圍分解圈（透明圈），分解圈越大說明該菌株的降解能力強．
（4）細菌種群進化過程中，其主要作用的變異來源是基因突變．
（二）富集培養(yǎng)是微生物學中的最強有力的技術手段之一．主要是利用不同微生物生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應該條件的微生物旺盛生長，從而使其數(shù)量大大增加．如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物--對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程．請分析回答下列問題．
（1）①→③重復培養(yǎng)的目的是擴大培養(yǎng)（使分解對羥基苯甲酸微生物的比例增高）．
（2）⑤的菌落中大部分是降解對羥基苯甲酸微生物．設置⑥的目對照作用．
（3）⑤→⑥采用單細胞挑取法，將所選菌種接種到⑥的培養(yǎng)基中，在此操作過程中如何防止雜菌污染（至少寫出兩點）．接種過程在火焰旁邊進行，接種前灼燒接種環(huán)，打開試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開時，在酒精燈旁打開一個縫隙等等．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種．
（3）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈（透明圈）越大．
（4）細菌是原核生物，沒有染色體變異和基因重組，其變異來源是基因突變．
（二）（1）經過①②③的重復培養(yǎng)，增大了分解對羥基苯甲酸的微生物的比例．
（2）培養(yǎng)的微生物主要是能降解對羥基苯甲酸的微生物，所以⑤的菌落中大部分是降解對羥基苯甲酸微生物．⑥中沒有對羥基苯甲酸，⑦中含有對羥基苯甲酸，所以⑥是對照組，對照的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物．
（3）接種過程在火焰旁邊進行，接種前灼燒接種環(huán)，打開試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開時，在酒精燈旁打開一個縫隙等等．
故答案為：
（一）（1）原油　選擇　
（2）平板劃線法　稀釋涂布平板法　
（3）分解圈（透明圈）     分解圈越大     強
（4）基因突變
（二）（1）擴大培養(yǎng)（使分解對羥基苯甲酸微生物的比例增高） 
（2）對羥基苯甲酸  對照作用
（3）接種過程在火焰旁邊進行，接種前灼燒接種環(huán)，打開試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開時，在酒精燈旁打開一個縫隙等等

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力．