Question

17．如圖是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖．請據(jù)圖回答：
（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需目的基因；二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的序列，推測出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的序列，再通過化學(xué)方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴增DNA時，需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有引物、4種脫氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成模板DNA．PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制．
（3）由A和載體B拼接形成C的過程通常稱為基因表達載體的構(gòu)建．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺處理D，其目的是使其成為感受態(tài)細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子．
（5）要檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞采用技術(shù)，要檢測目的基因是否表達DNA分子雜交，則采用抗原-抗體雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細胞．

解答 解（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需目的基因；二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的序列，推測出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的序列，再通過化學(xué)方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴增DNA時，需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有引物、4種脫氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成模板DNA．PCR技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制．
（3）由A和載體B拼接形成C的過程通常稱為基因表達載體的構(gòu)建．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺處理D，其目的是使其成為感受態(tài)細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子．
（5）要檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞采用DNA分子雜交技術(shù)，要檢測目的基因是否表達，則采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶　  DNA聚合酶 　目的    目的
（2）引物　模板DNA   DNA雙鏈復(fù)制
（3）基因表達載體的構(gòu)建
（4）使其成為感受態(tài)細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子   
（5）DNA分子雜交    抗原-抗體雜交

點評 本題結(jié)合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．