Question

【題目】家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。

（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。

（2）為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和__________之間；若要檢測干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá)，采用的技術(shù)有 和 。

（3）培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生貼壁生長和_________________現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

Answer 1

【答案】（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）

（2）啟動(dòng)子終止子 分子雜交技術(shù) 抗原-抗體雜交技術(shù)

（3）接觸抑制 增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積

【解析】（1）要獲得單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。

（2）外源目的基因要準(zhǔn)備表達(dá)，需要將將目的基因插入到表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間。要檢測外源基因是否轉(zhuǎn)錄可以用分子雜交技術(shù)，是否表達(dá)出蛋白質(zhì)可以使用抗原-抗體雜技技術(shù)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象。如果將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)容器中，可以增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積，培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量會(huì)增加。