Question

下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。

1、若圖2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，現(xiàn)在要培養(yǎng)乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需將該基因通過(guò) （方法）注入到羊的 中，則發(fā)育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。這一過(guò)程涉及到以下哪些過(guò)程 。

A．DNA自我復(fù)制 B．DNA以其一條鏈為模板合成RNA

C．RNA自我復(fù)制 D．按照RNA上密碼子的排列順序合成蛋白質(zhì)

2、限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同點(diǎn)是 。

3、圖2中的目的基因D需要同時(shí)使用MetⅠ和PstⅠ才能獲得，而圖1所示的質(zhì)粒無(wú)相應(yīng)的限制酶酶切位點(diǎn)。所以在該質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要對(duì)質(zhì)粒改造，構(gòu)建新的限制酶酶切位點(diǎn)。試幫助完成構(gòu)建需要的限制酶酶切位點(diǎn)的過(guò)程（提供構(gòu)建需要的所有條件）：首先用 a 處理質(zhì)粒；然后用 b 處理質(zhì)粒，使被切開(kāi)的質(zhì)粒末端連接上相應(yīng)的脫氧核苷酸；再用 c 處理質(zhì)粒，形成了的限制酶酶切割位點(diǎn)，它可被 d 識(shí)別。則a~d處依次是 。

①EcoRⅠ ②MetⅠ ③PstⅠ ④DNA連接酶 ⑤DNA聚合酶

A．③④⑤② B．③⑤④① C．①⑤④② D．②④⑤③

4、假設(shè)圖1質(zhì)粒上還有一個(gè)PstⅠ的識(shí)別序列，現(xiàn)用EcoRⅠ、PstⅠ單獨(dú)或聯(lián)合切割同一質(zhì)粒，得到如下表的DNA長(zhǎng)度片段。請(qǐng)?jiān)趫D20中畫(huà)出質(zhì)粒上EcoRⅠ和PstⅠ的切割位點(diǎn)。（標(biāo)出酶切位點(diǎn)之間長(zhǎng)度）

酶	DNA片段長(zhǎng)度（kb堿基對(duì)）
EcoRⅠ	14kb
PstⅠ	2．5kb、11．5kb
EcoRⅠ+ PstⅠ	2．5kb、5．5kb/6．0kb

5、檢測(cè)篩選是一個(gè)重要步驟。下圖表示在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種方法與培養(yǎng)方法，以檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入大腸桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有 。從篩選結(jié)果分析，含目的基因的是 （填編號(hào)）菌落中的細(xì)菌。

Answer 1