Question

【題目】環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解，受其污染的土壤中常有重金屬污染同時(shí)存在。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為______，該培養(yǎng)基屬于______（填“選擇”或“鑒定”）培養(yǎng)基。用平板劃線法純化該細(xì)菌時(shí)，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開(kāi)始是為了______。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用______技術(shù)，該技術(shù)的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是______。

（3）若從聯(lián)苯降解菌中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶，純化該酶常用的方法是______，采用該方法先分離出分子質(zhì)量______的蛋白質(zhì)。

（4）如圖實(shí)線表示聯(lián)苯水解酶催化的反應(yīng)速度與酶濃度關(guān)系，虛線表示在其他條件不變情況下，底物濃度增加一倍，反應(yīng)速度與酶濃度的關(guān)系，能正確表示兩者關(guān)系的是______

Answer 1

【答案】（唯一）碳源 選擇 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個(gè)菌落 固定化酶 提高產(chǎn)物的純度 凝膠色譜法 較大 B

【解析】

培養(yǎng)基根據(jù)用途分為：選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

常見(jiàn)的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法。

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，應(yīng)該用以多聚聯(lián)苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，只有聯(lián)苯降解菌可以存活。用平板劃線法純化該細(xì)菌時(shí)，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)要從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用固定化酶技術(shù)，該技術(shù)可使酶與產(chǎn)物分開(kāi)，因此提高了產(chǎn)物的純度。

（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此采用該方法先分離出分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。

（4）開(kāi)始時(shí)，酶濃度較低，無(wú)論底物是否加倍都不能增加反應(yīng)的速率；隨著酶濃度增大，增加底物，反應(yīng)速率會(huì)增加，故選B。