Question

【題目】高溫脅迫是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要因素之一，高溫會(huì)使番茄的生長(zhǎng)發(fā)育受到限制�？茖W(xué)家將來(lái)自土壤細(xì)菌中的codA基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄對(duì)高溫的耐受性大于野生型番茄。

回答下列問(wèn)題：

(1)過(guò)程①獲得的DNA片段________(填“可以”、“部分可以”或“不可以”)實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增codA基因時(shí)，操作過(guò)程中需要加熱至90～95℃的目的是_______________。

(2)去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)，過(guò)程③對(duì)已開(kāi)環(huán)的質(zhì)粒兩端去磷酸化的主要作用是_______；為使codA基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要將其插在啟動(dòng)子之后，目的是_____________。

(3)過(guò)程④最常用的方法是_____________，過(guò)程⑤用到的細(xì)胞工程技術(shù)是_____________。codA基因能否在番茄細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________________。

Answer 1

【答案】可以 目的基因受熱變性解旋為單鏈 防止質(zhì)粒自身環(huán)化 驅(qū)動(dòng)codA基因（目的基因）的轉(zhuǎn)錄 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) codA基因（目的基因）是否插入到番茄的染色休DNA上

【解析】

基因工程的工具：限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體。

基因工程的操作步驟：目的基因的獲��；構(gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)）；把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測(cè)和鑒定（分子水平檢測(cè)—DNA分子雜交法、分子雜交法、抗原抗體雜交，個(gè)體水平的檢測(cè)—抗蟲(chóng)抗病接種實(shí)驗(yàn)）。

圖中：①逆轉(zhuǎn)錄、③構(gòu)建基因表達(dá)載體、④把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、⑤植物組織培養(yǎng)。

（1）過(guò)程①獲得的DNA片段是反轉(zhuǎn)錄形成的，不含內(nèi)含子等序列，可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增codA基因時(shí)，加熱至90～95℃是為了打開(kāi)雙鏈。

（2）過(guò)程③構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，對(duì)已開(kāi)環(huán)的質(zhì)粒兩端去磷酸化可以避免質(zhì)粒自身環(huán)化；

啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，可以驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄，故為使codA基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要將其插在啟動(dòng)子之后。

（3）過(guò)程④把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，過(guò)程⑤指植物組織培養(yǎng)。codA基因能否在番茄細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞的染色體DNA上。