19．目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示．

（1）構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因，以便于篩選（鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞）．
（2）pBR32Z分子中有單個(gè)EcoRI限制酶作用位點(diǎn)，EcoR 1只能識(shí)別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割．若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRI的切點(diǎn)，請(qǐng)畫(huà)出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端．．
（3）pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過(guò)DNA連接酶作用恢復(fù)鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒．說(shuō)明限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端．
（4）為了檢測(cè)上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無(wú)ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落．再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果（空圈表示與圖二對(duì)照無(wú)菌落的位置）．與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是既能抗氨芐青霉素，又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒．

分析 分析題圖：菌落能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基生存，說(shuō)明了菌落含有抗氨芐青霉素基因；將沾上菌落絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，仍能生長(zhǎng)，說(shuō)明了菌落也含有抗四環(huán)素基因，不能生長(zhǎng)的則不含抗四環(huán)素基因．

解答 解：（1）質(zhì)粒上的抗性基因可作標(biāo)記基因，便于鑒定受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入目的基因．
（2）在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRⅠ的切點(diǎn)，即目的基因兩側(cè)有-GAATTC-，且EcoRⅠ的切割位點(diǎn)在G和A之間，因此目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端為．
（3）經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因能連接起來(lái)，說(shuō)明這兩種酶切割獲得的黏性末端相同．
（4）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，將四環(huán)素抗性基因破壞了，而沒(méi)有破壞氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存，而導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌在這兩種培養(yǎng)基上都能生存．因此圖二中的菌落能抗氨芐青霉素，將滅菌絨布按到圖二中培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到圖三含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，仍能生長(zhǎng)的也能抗四環(huán)素，空圈為不能抗四環(huán)素的（只能抗氨芐青霉素）．圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌既能抗氨芐青霉素，又能抗四環(huán)素，說(shuō)明導(dǎo)入的是pBR322質(zhì)粒，而不是重組質(zhì)粒（重組質(zhì)粒的四環(huán)素抗性基因被切斷，不能表達(dá)，因此含重組質(zhì)粒的大腸桿菌抗氨芐青霉素）．
故答案為：
（1）篩選（鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞）
（2）
（3）限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端．
（4）能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素      既能抗氨芐青霉素，又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握基因工程各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

9．下列說(shuō)法中正確的是（　�。�
A．干旱時(shí)，植物細(xì)胞內(nèi)自由水與結(jié)合水的比值升高
B．細(xì)胞學(xué)說(shuō)的創(chuàng)立使人們對(duì)生物的認(rèn)識(shí)進(jìn)入分子水平
C．徳國(guó)科學(xué)家施萊登和施旺是細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者
D．徳國(guó)科學(xué)家魏爾肖的名言是“所有的細(xì)胞都來(lái)源于先前存在的細(xì)胞”

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

10．變形蟲(chóng)的任何部位能伸出偽足，人體的某些白細(xì)胞能吞噬病菌，這些生理活動(dòng)的完成說(shuō)明細(xì)胞膜具有下列哪一特點(diǎn)（　�。�
A．選擇透過(guò)性B．一定的流動(dòng)性C．保護(hù)作用D．細(xì)胞識(shí)別

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

7．在“觀察洋蔥表皮細(xì)胞質(zhì)壁分離及質(zhì)壁分離復(fù)原”的活動(dòng)中，某同學(xué)在顯微鏡下觀察到紫色洋蔥表皮細(xì)胞正處于如圖所示的狀態(tài)．下列有關(guān)敘述不正確的是（　�。�
A．圖中細(xì)胞可能處于質(zhì)壁分離中，也可能正在復(fù)原過(guò)程中
B．圖中①表示細(xì)胞壁
C．本實(shí)驗(yàn)中質(zhì)壁分離的細(xì)胞和分離前的細(xì)胞相互對(duì)照
D．圖中結(jié)構(gòu)②的伸縮性小于圖中的結(jié)構(gòu)①

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：多選題

14．下列敘述中，與植物體細(xì)胞雜交密切相關(guān)的是（　�。�
A．利用離心、振動(dòng)、電刺激等誘導(dǎo)B．利用聚乙二醇（PEG）等試劑誘導(dǎo)
C．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙D．快速繁殖、培育無(wú)病毒植物

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：多選題

4．鼷鼠的T淋巴細(xì)胞在胸腺里、B淋巴細(xì)胞在骨髓里成熟、分化．B淋巴細(xì)胞遇到抗原就分裂增殖、分化并產(chǎn)生抗體．下面是為了開(kāi)發(fā)痢疾疫苗而把滅活的痢疾桿菌接種在鼷鼠的身上，并調(diào)查了痢疾桿菌抗體合成程度與T淋巴細(xì)胞對(duì)它起的作用（見(jiàn)圖）．對(duì)上述有關(guān)資料的解釋或推論不正確的是（　�。�
A．乙實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生了很多抗體是由于第一次接種時(shí)產(chǎn)生了記憶細(xì)胞
B．丙、丁實(shí)驗(yàn)中，若沒(méi)有胸腺則B淋巴細(xì)胞不會(huì)合成抗體
C．戊結(jié)果表示，抗體合成的最佳狀況需要T淋巴細(xì)胞的幫助
D．被痢疾桿菌感染后，預(yù)防痢疾的有效措施是接種疫苗

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

11．下列關(guān)于淋巴細(xì)胞的敘述，正確的是（　�。�
A．輔助性T淋巴細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-2能促進(jìn)漿細(xì)胞的增殖
B．致敏前的B淋巴細(xì)胞不能分泌進(jìn)入體液循環(huán)的抗體分子
C．效應(yīng)B細(xì)胞能發(fā)生“染色質(zhì)→染色體→染色質(zhì)”的變化
D．相同抗原再次入侵機(jī)體時(shí)，記憶細(xì)胞毒性T細(xì)胞會(huì)迅速將其殺滅

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

8．人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原．其疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程如圖：

請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）過(guò)程①需要在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的作用下進(jìn)行．
（2）過(guò)程②構(gòu)建A基因表過(guò)載體時(shí)，必須使用的兩種工具酶是限制性內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶．
培養(yǎng)基特殊成分主要作用
次黃嘌呤骨髓瘤細(xì)胞不能利用
氨基蝶嘌呤阻斷DNA合成
胸腺嘧啶核苷脾細(xì)胞可用于合成DNA
（3）過(guò)程③進(jìn)行的是細(xì)胞融合和篩選，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性（填特性），與植物原生質(zhì)體融合相比，特有的促融方式是用滅活的仙臺(tái)病毒促融．篩選過(guò)程中，可在培養(yǎng)基中加入表中的成分來(lái)實(shí)現(xiàn)，其原理是：?jiǎn)渭兊墓撬枇黾?xì)胞因不能利用次黃嘌呤無(wú)法增殖，雜交瘤細(xì)胞可以增殖，培養(yǎng)基中能夠增殖的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
（4）過(guò)程④的主要目的是通過(guò)選擇獲得X，X是能夠產(chǎn)生抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（5）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗．對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸（或基因）序列比較；或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

16．胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提�。韵聻槟惩瑢W(xué)利用酵母菌R獲得胡蘿卜素的部分流程．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
酵母菌R的篩選→酵母菌R的培養(yǎng)→菌體裂解→離心沉淀→萃取→萃取物→胡蘿卜素的鑒定
（1）采用平板劃線法接種酵母菌R時(shí)，需先灼燒接種環(huán)，其目的是殺滅接種環(huán)上的微生物．培養(yǎng)酵母菌R時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供碳源和氮源．
（2）為了驗(yàn)證萃取物是否是胡蘿卜素，該同學(xué)將葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、萃取物和色素混合液（含葉綠素b、葉綠素a、葉黃素和胡蘿卜素）依次點(diǎn)樣在濾紙的1、2、3、4、5位置（如圖甲所示），并進(jìn)行層析，濾紙條上各色素帶的位置為B（填字母）時(shí)，即可說(shuō)明該萃取物最可能是胡蘿卜素．

（3）酵母菌R能分泌A、B兩種酶，圖乙是某課題組關(guān)于這兩種酶的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
①圖中結(jié)果顯示，在40℃至60℃范圍內(nèi)，熱穩(wěn)定性較好的酶是A酶．高溫條件下酶容易失活，其原因是高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞．
②由圖丙可知，若要從酵母菌R種群中篩選出能產(chǎn)生熱穩(wěn)定性高的酶的菌株，應(yīng)在大于或等于80℃的條件下培養(yǎng)．
（4）若用海藻酸鈉固定酵母菌R，應(yīng)將海藻酸鈉溶液和酵母菌R混合滴入CaCl2溶液中．下表是在不同濃度海藻酸鈉條件下形成的凝膠珠狀況：
海藻酸鈉質(zhì)量濃度（g/dL）凝膠
強(qiáng)度		凝膠
氣泡量		成球
難度		凝珠
形狀
1.0中沒(méi)有較易扁圓形
2.0中少量易圓球形
3.0強(qiáng)較多稍難有托尾
4.0強(qiáng)大量難難成球形
從表中看出，海藻酸鈉的濃度應(yīng)選用2.0g/dL．利用固定化細(xì)胞技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可重復(fù)利用，且利于產(chǎn)物的純化．

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同步練習(xí)冊(cè)答案