Question

9．為了調(diào)查贛江的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作．回答下列問題：
（1）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的是調(diào)整pH和滅菌，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．倒平板時(shí)要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染．
（2）該小組可采用圖②所示的稀釋涂布平板法（方法）檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量．在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×10⁷．
（3）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌．操作時(shí)，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落不連續(xù)單個(gè)菌落．
（4）在純化過程中，在固體培養(yǎng)基上劃線分離過程中，正確的操作是D
A．每次劃線時(shí)，接種環(huán)都需要蘸菌液一次
B．劃線分離時(shí)，需要把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進(jìn)行接種
C．劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連
D．在超凈平臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)，不能關(guān)閉過濾風(fēng)．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中細(xì)菌的分離的方法為①表示平板劃線法，②表示稀釋涂布平板法．
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，在各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的是調(diào)整pH和滅菌，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．倒平板時(shí)要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染．
（2）該小組可采用圖②所示的稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量．微生物培養(yǎng)過程應(yīng)該進(jìn)行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)以檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底；由由題意知1ml水樣中的菌落數(shù)是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10⁴個(gè)，每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷．
（3）平板劃線法操作時(shí)，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落不連續(xù)單個(gè)菌落．
（4）A、平板劃線法中，接種環(huán)只需要蘸菌液一次，進(jìn)行連續(xù)幾次劃線操作，A錯(cuò)誤；
B、劃線分離時(shí)，不能把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進(jìn)行接種，只能在培養(yǎng)基表面進(jìn)行劃線操作，B錯(cuò)誤；
C、劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)的劃線相連，C錯(cuò)誤；
D、在超凈平臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)，不能關(guān)閉過濾風(fēng)，D正確．
故答案為：
（1）調(diào)整pH      高壓蒸汽滅菌      防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染
（2）稀釋涂布平板法檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格       3.8×10⁷
（3）將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落不連續(xù)單個(gè)菌落     
（4）D

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的理解與掌握．