Question

6．天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用．研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)人釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精．請(qǐng)回答下列問題：
（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是限制酶（限制性內(nèi)切酶），用將淀粉酶基因DNA連接酶與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，以完成工程菌的構(gòu)建．
（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測(cè)方法是DNA分子雜交技術(shù)；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用抗原-抗體雜交或淀粉酶活性檢測(cè)．

Answer 1

分析 1、基因工程操作的工具是限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．
2、基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．
3、目的基因的檢測(cè)有多種手段，如①DNA分子雜交技術(shù)；②分子雜交技術(shù)；③抗原-抗體雜交技術(shù)．
4、運(yùn)載體通常用動(dòng)植物病毒和質(zhì)粒，質(zhì)粒通常為小型環(huán)狀的DNA分子．
5、重組DNA分子受體細(xì)胞的機(jī)率比較小，對(duì)是否導(dǎo)入和表達(dá)還需要進(jìn)行檢測(cè)．

解答 解：（1）將目的基因（淀粉酶基因）切割下來所用的工具是限制酶，將淀粉酶基因和運(yùn)載體連接起來需要DNA連接酶，之后將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，以完成工程菌的構(gòu)建．
（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用DNA分子雜交技術(shù)；要鑒定目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交技術(shù)；因?yàn)樵摴こ叹�產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈．所以也可以通過檢測(cè)淀粉酶活性來檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，即將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時(shí)間后，加入碘液檢驗(yàn)，并檢驗(yàn)工程菌菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈．
故答案為：
（1）限制酶（限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶 導(dǎo)入受體細(xì)胞
（2）DNA分子雜交技術(shù) 抗原-抗體雜交或淀粉酶活性 會(huì)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具和操作步驟，能應(yīng)用基因工程技術(shù)培育獲得的釀酒酵母工程菌，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查，這類試題需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中學(xué)會(huì)構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)．