Question

2．某些細(xì)菌可分解有機(jī)磷農(nóng)藥水胺硫磷，水胺硫磷的噴灑使土壤受到污染．某同學(xué)欲從受農(nóng)藥污染的土壤中篩選出高效降解有機(jī)磷農(nóng)藥的菌株．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以水胺硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基上．從用途上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）若要測(cè)定稀釋液中的菌體數(shù)可在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)．若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，使用該計(jì)數(shù)方法時(shí)研究人員分布在6個(gè)培養(yǎng)基平板上接種稀釋倍數(shù)為10⁴的稀釋液各0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出菌落數(shù)分別為19、130、166、400、188、116，則每克樣品中的活菌數(shù)為1.5×10⁷個(gè)．
（3）為了篩選出高效菌落，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌落的降解能力強(qiáng)．
（4）下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是D
A．要準(zhǔn)確檢測(cè)總菌數(shù)可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0．lmL，分別涂布于各組平板上
C．運(yùn)用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)也要進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?br />D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、稀釋涂布平板法分離微生物時(shí)，應(yīng)選擇30-300的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)．
3、兩種純化細(xì)菌的方法的比較

	優(yōu)點(diǎn)	缺點(diǎn)	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離	不能計(jì)數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，“欲從受農(nóng)藥污染的土壤中篩選出高效降解有機(jī)磷（水胺硫磷）農(nóng)藥的菌株”，因此在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以水胺硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基上．從用途上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）若要測(cè)定稀釋液中的菌體數(shù)可在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)．若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．應(yīng)選擇30-300的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，每克樣品中的活菌數(shù)=（130+166+188+116）÷4÷0.1×10⁴=1.5×10⁷個(gè)．
（3）為了篩選出高效菌落，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌落的降解能力強(qiáng)．
（4）A．要準(zhǔn)確檢測(cè)總菌數(shù)可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，A正確；
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0．lmL，分別涂布于各組平板上，B正確；
C．如果菌液濃度過(guò)高時(shí)，運(yùn)用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)也要進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂�，C正確；
D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤．
故答案為：
（1）水胺硫磷   選擇
（2）血球計(jì)數(shù)板    稀釋涂布平板  1.5×10⁷
（3）強(qiáng)
（4）D

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生掌握選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)，識(shí)記分離和純化微生物常用的兩種方法，掌握采用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的具體過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．