Question

15．如圖為銀川環(huán)保部門對(duì)艾依河段的大腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)的操作和配方圖．據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：

（1）圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于（填“大于”或“小于”）大腸桿菌．
（2）配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無機(jī)鹽和瓊脂以外，還應(yīng)加入氮源（蛋白胨）．待各成分都熔化后，調(diào)整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板．大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別（鑒定）培養(yǎng)基．
（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個(gè)菌落．
（4）要檢測(cè)樣液中的大腸桿菌含量，取1ml河水樣本，加入4ml無菌水，充分混勻后，在3個(gè)平板上用涂布平板法分別接入0.1ml樣液，在37℃的培養(yǎng)箱中放置48小時(shí)，3個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為51、50、49．據(jù)此可得出1ml河水樣本中活菌數(shù)為2.5×10³（或2500）個(gè)．
（5）該小組通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目，計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目，理論上他們的統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低（偏高/偏低），理由是兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落．

Answer 1

分析 分析題圖可知，實(shí)驗(yàn)將待測(cè)水樣進(jìn)行過濾，得到的濾膜進(jìn)行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，則濾膜上小孔的直徑大小需要控制．
培養(yǎng)基的基本成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，另外鑒別培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，必須加入凝固劑瓊脂．

解答 解：（1）分析圖解可知，實(shí)驗(yàn)將待測(cè)水樣進(jìn)行過濾，得到的濾膜進(jìn)行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，即圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌．
（2）培養(yǎng)基的基本成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，圖中乳糖為碳源，因此培養(yǎng)基中還應(yīng)該加入氮源．待各成分都熔化后，調(diào)整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板．大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別（鑒定）培養(yǎng)基．
（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個(gè)菌落．
（4）取1ml河水樣本，加入4ml無菌水，說明稀釋倍數(shù)為5倍；根據(jù)根據(jù)題干數(shù)據(jù)，可以計(jì)算1ml河水樣本中活菌數(shù)=（51+50+49）÷3÷0.1×5=2500個(gè)．
（5）由于培養(yǎng)基中兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落，因此理論上他們的統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低．
故答案為：
（1）小于   
（2）氮源（蛋白胨）     倒平板     鑒別（鑒定）
（3）將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個(gè)菌落    
（4）2.5×10³（或2500）
（5）偏低  兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)、培養(yǎng)基的成分以及大腸桿菌的鑒定等有關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．