Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)材料，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。

（1）下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。

成分	含量
蛋白胨	10．0g
乳糖	5．0g
蔗糖	5．0g
K2HPO4	2．0g
顯色劑	0．2g
瓊脂	12．0g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于___________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌需將培養(yǎng)基中_________換成__________，若要鑒定分解尿素的細(xì)菌還需將伊紅美藍(lán)換成___________。

（2）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，常用的接種方法是_______________________。

（3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前通常需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是____________。對(duì)已使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)____________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（4）現(xiàn)有一升水樣，用無(wú)菌吸管吸取1mL水樣至盛有9 mL無(wú)菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度。各取0． 1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為____________。

（5）為檢測(cè)嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為____________的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是____________________________________。

Answer 1

【答案】鑒別 蛋白胨 尿素 酚紅指示劑 平板劃線法和稀釋涂布平板法 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 滅菌 5．6×108 黑色 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌

【解析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

（1）該培養(yǎng)基含有顯色劑，根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。若要分離能分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中需要以尿素作為唯一的氮源，故需要將蛋白胨換成尿素，若要鑒定分解尿素的細(xì)菌還需將伊紅美藍(lán)換成酚紅指示劑，觀察是否變紅。

（2）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，可以選擇平板劃線法和稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。

（3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前可以將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)已使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（4）每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為（55+56+57）÷3×104×103=5.6×108。

（5）由于代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色，故要檢測(cè)嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，故可以通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)。