Question

6．請回答下列有關(guān)胚胎工程和基因工程等方面的問題：
（1）哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植．利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植技術(shù)的難度明顯高于利用胚胎細(xì)胞講行核移植的原因是體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性．
（2）在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過電脈沖（電剌激）（物理方法）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育，當(dāng)胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段時，將胚胎植入同種的、生理狀態(tài)相同的另一雌性（代孕）動物體內(nèi)．為獲得多只與該哺乳動物遺傳物質(zhì)相同的個體，還可使用胚胎分割技術(shù)．
在“試管�！钡呐嘤�過程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行獲能處理．該處理有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法兩種方法．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至II中期（減數(shù)第二次分裂中期），該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細(xì)胞和第一極體．
（3）在基因工程中若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ蛋白，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因的啟動子、人抗凝血酶III蛋白基因、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點等．目前常用的措施是將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵（填“受精卵”或“乳腺細(xì)胞”）．若要檢測牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用抗原-坑體雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、受精前的準(zhǔn)備階段：
（1）準(zhǔn)備階段1-精子獲能．剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力．
（2）準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動物排出的可能是初級卵母細(xì)胞也可能是次級卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力．

解答 解：（1）由于體細(xì)胞分化程度高，全能性較低，因此利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植技術(shù)的難度明顯高于利用胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植．在哺乳動物的核移植實驗中，一般通過電脈沖（或電刺激）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育；當(dāng)胚胎發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段時，將胚胎植入另一雌性（代孕）動物體內(nèi)．來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此為獲得多只與該哺乳動物遺傳物質(zhì)相同的個體，還可使用胚胎分割技術(shù)．
（2）精子獲能的方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法兩種方法．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至MⅡ中期，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細(xì)胞和第一極體．
（3）在基因工程中若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人抗凝血酶Ⅲ蛋白，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、人抗凝血酶Ⅲ蛋白基因（或目的基因）、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點等．培育轉(zhuǎn)基因動物時，常以受精卵為受體細(xì)胞，且將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．若要檢測牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性     電脈沖（電剌激）    胚胎分割
（2）培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法      II中期（減數(shù)第二次分裂中期）
（3）人抗凝血酶III蛋白基因     受精卵     抗原-坑體雜交

點評 本題考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記核移植的具體過程；識記胚胎移植的基本程序；識記基因工程的具體操作步驟，掌握各步驟中的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．