Question

利用以下提供的酶和質(zhì)粒，選用合適的酶切后構(gòu)建了滿足篩選需求的目的基因-質(zhì)粒連接物（標(biāo)為D）下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（　�。�

• A、DNA上某個(gè)特定的酶切位點(diǎn)可能不止一種限制性核酸內(nèi)切酶可以剪切
• B、構(gòu)建連接物D時(shí)若用MboⅠ剪切質(zhì)粒，則會(huì)導(dǎo)致基因工程的成功率降低
• C、目的基因的結(jié)構(gòu)中必須有限制酶BamHⅠ或MboⅠ的切點(diǎn)
• D、連接物D中MboⅠ的酶切位點(diǎn)至少有3個(gè)，而BamHⅠ的酶切位點(diǎn)可能有2個(gè)或1個(gè)或0個(gè)

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：限制酶：主要從原核生物中分離純化出來(lái)．特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
據(jù)圖分析，BamHⅠ和MboⅠ能形成相同的黏性末端；質(zhì)粒中抗生素A抗性基因是BamHⅠ的識(shí)別和切割位點(diǎn)；抗生素B抗性基因是MboⅠ的識(shí)別和切割位點(diǎn)．

解答： 解：A、據(jù)表格分析，BamHⅠ和MboⅠ的識(shí)別序列不同，但限制酶MboⅠ能切割BamHⅠ的識(shí)別位點(diǎn)，故A正確；
B、分析質(zhì)粒，MboⅠ的識(shí)別位點(diǎn)有2個(gè)，質(zhì)粒將形成兩個(gè)線性片段，不利于目的基因的連接，而且所有的標(biāo)記基因都被破壞，故B正確；
C、目的基因的結(jié)構(gòu)中不能含有有限制酶BamHⅠ或MboⅠ的切點(diǎn)，會(huì)破壞基因結(jié)構(gòu)，故C錯(cuò)誤；
D、假如用限制酶BamHⅠ處理質(zhì)粒插入目的基因后，形成的連接物D中MboⅠ的酶切位點(diǎn)至少有3個(gè)，位于抗生素B抗性基因和目的基因的兩側(cè)；如目的基因插入位點(diǎn)是抗生素A抗性基因，則形成重組質(zhì)粒后，BamHⅠ的酶切位點(diǎn)有2個(gè)，位于目的基因兩側(cè)；如目的基因插入位點(diǎn)是抗生素B抗性基因，則形成重組質(zhì)粒后，BamHⅠ的酶切位點(diǎn)有1個(gè)，位于抗生素A抗性基因；如用MboⅠ的酶處理質(zhì)粒插入目的基因后，則BamHⅠ的酶切位點(diǎn)有0個(gè)，故D正確．
故選：C．

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程中限制酶的功能，意在考查學(xué)生分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，難度較大．